Выставка ОСМ-2019

Выставка «Отечественные Строительные Материалы» (ОСМ) открывает ежегодный календарь строительных выставок Москвы.

За время своего существования выставка «Отечественные Строительные Материалы» приобрела значимость для строительной индустрии, став крупным профессиональным событием в этой сфере и являясь единственной в России выставкой, отражающей достижения и возможности российского рынка и производителей строительных материалов. Сегодня выставка ОСМ — это мероприятие государственного масштаба, являющееся эффективным рычагом для продвижения отечественных строительных материалов на строительном рынке России и направлена на поддержку отечественного производителя.

Создан метод производства биокирпичей, которые стоят дешевле обычных.

Авторы изобретения смогли решить как минимум, сразу две проблемы — избавить землю от биоотходов и сократить ущерб, который наносится природе строительной индустрией, ежегодно добывающей около 3 миллиардов кубометров глины для изготовления кирпичей.

В Австралии ученые одного из университетов создали биокирпичи, содержащие в своем составе твердые биоотходы. Достижение технологии заключается в том, что при ее применении получаются кирпичи, стоящие дешевле обычных. Экономия при производстве заключается в том, что биоотходы при обжиге быстро выгорают, что сокращает затраты энергии на этот процесс до 48%. Также полученный таким образом кирпич имеет поры, а это увеличивает теплоизоляционные свойства данного стройматериала.

Новая технология уже прошла экологический аудит, признавший ее полезной для окружающей среды. Теперь остается решить только еще одну, но немаловажную проблему — состав добавляемых биоотходов, ведь в разных регионах планеты и биомусор по своим характеристикам различается. Поэтому требуются дополнительные исследования для того, чтобы создать если не универсальную, то пригодную для использования в большинстве регионов технологию.

История Норского керамического завода началась 1 июля 1977 года. Он сразу получил свою известность, став первым в стране заводом-автоматом по выпуску керамического кирпича, работающего на комплексном импортном оборудовании из Италии, Франции, Швейцарии, Германии, Англии и других зарубежных стран.

Сегодня Норский завод является передовым предприятием не только Ярославской области, но и строительной отрасли России. Ежегодно выпускается более 100 млн. штук условного кирпича, который нашел применение во многих регионах страны.

Норский завод более 38 лет обеспечивает строителей качественным и экологически чистым строительным материалом. За эти годы на стройки России, от Архангельска до Сочи, предприятием поставлено более 3 миллиардов штук керамического кирпича.

Большой ассортимент выпускаемой продукции позволяет производить полную комплектацию объектов строительства от фундамента до облицовки стен фасадов зданий и сооружений.

Белгородская керамика — это современное, развивающиеся предприятие, производящее и поставляющее высококачественный керамический кирпич на российский рынок.

Продукция завода производится из экологически чистого природного материала глины, добываемой из собственных карьеров. Завод выпускает 30 млн. штук условного кирпича в год.

Промышленное предприятие представляет собой законченный комплекс по производству керамического кирпича, способом пластического формования, спроектированный фирмой «ALTA» Чешская Республика и оснащенный оборудованием чешского производства. Комплекс смонтирован и эксплуатируется на трех пролетах производственных корпусов общей площадью 5000 кв. м.

Белгородская керамика прочно завоевало репутацию одного из лучших в Центральном регионе России. Наш кирпич востребован при строительстве жилых зданий, объектов социальной сферы (школы, детские сады, больницы и др) промышленного и не промышленного назначения (банки, офисы, торговые центры и др).

«Обольский керамический завод» – один из старейших производителей строительных материалов в Беларуси. Кирпич из Оболи в разные годы поставлялся на самые масштабные стройки Советского Союза. Корпуса заводов, фабричные цеха и стены жилых зданий, годами сохраняющие прочность конструкций, – лучшее доказательство качества продукции предприятия.
История завода берет начало в 1929 году, именно тогда в Оболе был организован сезонный выпуск кирпича. С момента образования и по сегодняшний день завод непрерывно развивался и реконструировался: переоснащались цеха сырца и обжига, строилась механическая, транспортная и погрузо-разгрузочная базы. И сегодня на предприятии проводится целый ряд модернизационных мероприятий.
Одним из преимуществ новой технологической линии стала переработка сырья каскадом вальцев с последующим формованием кирпича на мощном прессе PL100. Подготовка полуфабрикатной массы осуществляется специальными машинами, установленными последовательно и образующими технологическую линию переработки глины. Дробление крупных комков до размеров частиц 100 мм осуществляется глинорыхлителями.

Далее приготовленная шихта подвергается повторному дроблению и выделению камней, где размер комьев снижается от 100 до 20 мм и ниже. В вальцах грубого и тонкого помола, работающих с зазором 3-5 мм и 1,6-2,5 мм, шихта последовательно измельчается раздавливанием и растиранием.
Внедрение этих методов позволило избежать формирования крупных фрагментов: размолотая шихта подается на формовку с размером частиц не более 1,5 мм, с равномерной влажностью и усредненным физико-химическим составом, что существенно повышает качество состава керамических изделий. Дальнейшая садка на печные вагонетки полностью автоматизирована и осуществляется роботами, благодаря чему существенно снижаются издержки, а следовательно и себестоимость продукции. Также ОАО «Обольский керамический завод» совместно с фирмой «SABO» установили новый автомат предварительной резки и боковой резчик со снятием фаски с облицовочного кирпича. Данная новация позволит выпускать кирпич, идеально соответствующий геометрическим размерам, указанным в паспорте изделия.

Калужский кирпичный завод, принадлежащий американскому концерну «Terex» является одним из передовых производителей кирпича в России и за её пределами. Американская фирма имеет практически вековую историю и успела зарекомендовать себя качественным производителем в строительной сфере. Кирпич Терекс за короткий промежуток времени завоевал популярность на современном рынке строительных материалов благодаря своему качеству и надёжности.

Для производства кирпича используется уникальное огнеупорное тугоплавкое сырьё из Кондровского рудника. В производстве используется современное профессиональное оборудование фирмы Ceric (Франция) с помощью которого появляются все виды продукции завода.

Мощность предприятия позволяет выпускать 2 миллиона единиц кирпича за год, что является показателем высокой производительности. Продукция компании имеет огромное преимущество над товарами конкурентов благодаря высокому качеству и подходу к производству по международным.

История производства газобетонного блока, организовывалась на заводах, выпускающих известь и силикатный кирпич. Такие производства имели собственные карьеры известняка или мела и песка. Сырье, применяемое для силикатного кирпича, не подходило для газобетонов поэтому изделия, производимые на этих заводах, получали с низкими показателями.

В Калужской области в 2016 году — введен в эксплуатацию завод по производству газобетонного блока автоклавного твердения под ТМ «Калужский газобетон» на технологической линии фирмы WKB.

В процессе химической реакции между компонентами смеси происходит выделение газа, которое приводит к образованию многочисленных пор в структуре материала. После затвердения массива, происходит его нарезка специальным оборудованием.

Завершается процесс создания нового материала многочасовой обработкой насыщенным влажным паром — автоклавированием.

Предприятие производит газобетонные блоки автоклавного твердения, плотностей D300, D400, D500. D600 и U-образные блоки.

Isolontape (Изолонтейп) — это широкий ассортимент самоклеющегося Изолона, теплоизоляционного и звукоизоляционного материала в рулонах, листах или лентах, белого или серого цветов. На вспененный полиэтилен Изолон нанесят с одной или с двух сторон высококачественный каучуковый или акриловый клей, которые обеспечивают высококачественное крепление самоклеющегося вспененного полиэтилена Isolon к металлу, дереву, пластику, лакокрасочным и другим поверхностям в течении всего срока эксплуатации.

Посетив выставку ОСМ 2019 на ЦВК «Экспоцентр» и ознакомившись с выставленными на стендах участников выставки образцами можно сделать вывод, что строительная индустрия нашей страны не стоит на месте, а развивается и имеет хорошие перспективы. Однако, значительная часть достижений получены за счёт внедрения и использования импортного оборудования и технологий, а также исследований и разработок зарубежной науки. К сожалению модернизация отечественной промышленности строительных материалов развивает зарубежные науку, технологии производства.

Подготовил инженер ЛИСМиК Тараканов С.А.

«ОСМ» 2019 / Отечественные строительные материалы / Выставочный портал GeneralExpo.ru

20-я специализированная выставка «Отечественные строительные материалы (ОСМ)»-2019. с 29 Января по 01 февраля 2019 состоится выставка «ОСМ» 2019 а также КЕРАМБРИКТЕХ представят свои новинки и технологии.

с 29.01.2019 по 01.02.2019

Тип: Выставка

Тематики: Строительные материалы. Инструменты

Город/Регион: Москва / Россия;

Организатор: Евроэкспо

Площадка: ЭКСПОЦЕНТР (ЦВК)

Адрес: ЦВК «Экспоцентр»
Москва, Краснопресненская наб., 14, пав.7
Станция метро «Выставочная» (ранее – «Деловой центр»)
(50 м от Западного входа ЦВК «Экспоцентр»)

E-mail:

Cайт: http://www. osmexpo.ru

Описание:

Проект входит в тройку крупнейших отраслевых выставок стройиндустрии, заслуженно отмечен знаками Всемирной ассоциации выставочной индустрии (UFI) и Российского союза выставок и ярмарок (РСВЯ). Выставка проходит при поддержке МИНПРОМТОРГ РФ, ведущие отраслевые ассоциации НОПСМ, АПКСМ, АПСИ, НААГ.
Известные бренды строительных и отделочных материалов российского и зарубежного производства, представят свою продукцию в таких тематических разделах:

— Стеновые материалы, конструкции;
— Отделочные, облицовочные материалы, фасады;
— Элементы мощения;
— Тепло — и гидроизоляция;
— Сухие строительные смеси;
— Оборудование для производства стройматериалов;
— Строительное оборудование и инструменты;
— Упаковка и транспортировка

Преимущество выставки ОСМ заключается в концентрированном сочетании экспозиции, продвижении продаж, личных контактах, а также достаточно широком спектре посетительской аудитории от профессионалов до обывателей, которые планируют строительство или благоустройство собственного дома.

Ближайшие похожие мероприятия

PR+ FORUM 2022

V Всероссийский форум директоров по коммерческим закупкам VPROC 2022

MOSBUILD/МОСБИЛД 2022

RUSSIA EXPO: BUILD

Выставка «Загородный дом»

Транспортная Светотехника 2022

bauma CTT Russia 2022

Московское Международное Индустриальное Шоу «Мебель HUB»

СмартКурорт 2022

Распечатать страницу

Российские полимерные стройматериалы Гидрол-Руфинг на прошедшей выставке ОСМ-2019

С 29 января по 1 февраля 2019 года в ЦВК «Экспоцентр» прошла ежегодная специализированная выставка «Отечественные Строительные Материалы» (ОСМ 2019). Организатор – выставочная компания «Евроэкспо».

20 лет вместе с нами участниками выставки — компания «Евроэкспо», осуществляющая национальный проект России! Как заметил организатор, «…крупные российские строительные выставки все меньше решают проблемы, связанные с продвижением на отечественный рынок национальной продукции», поэтому ОСМ так важна для нас, она посвящена развитию и продвижению на отечественный рынок нашей российской продукции и материалов, российских брэндов и марок «сделано в РФ»!

В выставке «ОСМ 2019» приняли участие более 300 компаний, 11 стран участников выставки (по данным выставочного каталога), за четыре дня выставку посетило 12 500 посетителей, программа была интересной и насыщенной.

Компания НПО «Гидрол-Руфинг» традиционно является постоянным участником этого представительного национального отраслевого форума «Отечественные Строительные Материалы-2019: итоги, вызовы, перспективы» и выставки «ОСМ-2019».

Разработанные компанией «Гидрол-Руфинг» высокоэластичные полимерные кровельные гидроизоляционные материалы имеют:

• диапазон сохранения эластичных свойств от −60°C до +130°C;
• химстойкость и биостойкость при весе от 0,7 до 2 кг/м²;
• технологичность при устройстве и ремонте кровель;
• максимально исключают влияние человеческого фактора на качество работ.

Надёжность и долговечность кровель и гидроизоляции из наших материалов, перспективное обслуживание клиентов, контроль качества, согласованные сроки поставки и конкурентные цены являются нашей отличительной чертой.

Наш материал — это средство для вашей цели: иметь надежную и долговечную кровлю

На стенде компании НПО «Гидрол-Руфинг» была представлены материалы: линейка ПВХ-мембран «Кровлелон», линейка ЭПДМ-мембран «Элон-Супер» и линейка мастик Унимаст.

Предыдущая » Посетите наш стенд на ОСМ-2019Следующая » Выставка «ОСМ-2019»: какова она была?

ХХI-я специализированная выставка «Отечественные строительные материалы» открывает календарный год строительных выставок в Москве

Новый календарный год строительных выставок России открывает уже полюбившаяся многим выставка отечественных строительных материалов «ОСМ». Всех профессионалов строительной отрасли ждут 28-31 января в Москве на территории ЦВК «ЭКСПОЦЕНТР», станция метро «Выставочная».

Регистрация для посетителей и участников доступна по ссылке

Мы ежегодно освещаем выставку «ОСМ» на страницах своего блога. С материалами о прошлых выставках «Отечественные строительные материалы» Вы можете ознакомиться по следующим ссылкам:

Открытие выставки «Отечественные строительные материалы – 2019»
Отечественные строительные материалы-2018
Открытие выставки «Отечественные строительные материалы-2017» в Экспоцентре
Выставка «ОСМ 2015»
Отечественные Строительные Материалы-2014
Выставка «Отечественные строительные материалы» завершилась в Москве

Выставка «ОСМ» — важное мероприятие в отрасли, которое направлено на поддержку отечественного производителя. Как утверждают организаторы, участие в выставке может стать для производителя эффективным способом продвижения своего товара на потребительском рынке России. 

Организаторы заявляют, что в этом году в выставке примут участие производители стеновых и облицовочных материалов таких компаний как БОНОЛИТ, THERMOCUBE, ТД КЕРАМИК-ЦЕНТР, ВЫШНЕВОЛОЦКИЙ КЗ, НОРСКИЙ КЗ, ТЕРБУНСКИЙ ГОНЧАР, РЯЗАНСКИЙ КЗ, ВОРОТЫНСКИЙ КИРПИЧ, КОСТРОМСКОЙ СЗ, БОРСКИЙ СЗ, ЛИПЕЦКИЙ СЗ, ЭНГЕЛЬСКИЙ КЗ, ГЖЕЛЬСКИЙ КЗ, КЕРАМИКА (ВИТЕБСК), ОБОЛЬСКИЙ КЗ, РАДОШКОВИЧСКИЙ КЗ и других.

Также свои новинки представят компании, которые производят сухие строительные смеси, кровельные и гидроизоляционные материалы, лакокрасочные изделия, строительную химию, тротуарную плитку, различные приборы для измерений, контроля и испытаний: АЛИТМИКС, ГИДРОПАКОЛЬ, РУССКАЯ ПАНЕЛЬ ГРУП, НПО ГИДРОЛ-РУФИНГ, ВЛКЗ ОЛИВА, ТРОТУАРНЫЕ ФОРМЫ СИБИРИ, НПК ХИМСВЕТ, ЭПИТАЛ, РУСДЕРЕВО, НПП ИНТЕРПРИБОР, КТБ СТРОЙПРИБОР и многие другие.

На выставке состоится седьмой «Салон станков, оборудования, технологий и сырья для индустрии керамической промышленности КЕРАМБРИКТЕХ». Здесь своими разработками поделятся компании: KIMPE RUS, VERDES, ЭСТЕЗО ТРЕЙД, ХЕНДЛЕ-БРАУН, ROTHO, ТЕХНОСТРОМ, ОМС СИСТЕМС KELLER, АВЕЛД, BERALMAR, FORGESTAL, EQUIPCERAMIC, BEDESCHI, LINCO BAXO, COLOROBBIA, SABO, AR-SAN MAKINA, BONGIOANNI MACCHINE, COSMEC, HANS LINGL, MARCHELUZZO CERAMICS, CISMAC, ПЕТЕРСЕН САМАРА и др.

Дебютантами ОСМ-2020 станут компании: ММК-ЛЫСЬВЕНСКИЙ МЕТАЛЛУРГИЧЕСКИЙ ЗАВОД, ГК СВЕЖИЙ ВОЗДУХ ТАМАК, ТЕХНОСТРОМ, РЕЛИЗ, ПОЛИМЕР МК, ХИМВОЛОКНО, СОЮЗМАШМЕТАЛЛ, РВ ПЛАСТ, АРИЯСТРОЙ, ПЕРВЫЙ ДОМОСТРОИТЕЛЬНЫЙ КОМБИНАТ, ГАЛЕН, МИАКОМ СПБ, ЗАВОД ЛИТ, ПРОФКЛЕЙ, РЕКТОР РУС, ЛЕНИНГРАДСКИЙ ПОДШИПНИК и что важно, этот список пополняется ежедневно.

Специально для ОСМ-2020 при поддержке Фонда «Сколково» и Союза разработчиков и производителей экологического машиностроения — Recycling Waste Expo (RWExpo) разработана экспозиция, рассказывающая о процессах организации эффективной системы переработки и управления промышленными отходами в сфере строительства. Новая площадка создается для обмена идеями, поиска инвесторов и создания условий для взаимовыгодного партнерства.  

Посетить выставку можно 28 — 31 января. Регистрация для посетителей обязательна.

В «Экспоцентре» открылась выставка «Отечественные Строительные Материалы – 2019»

29 января 2019 года в павильоне № 7 ЦВК «Экспоцентр» на Красной Пресне (Москва, Краснопресненская наб., д. 14) открылась юбилейная 20-я специализированная выставка «Отечественные Строительные Материалы-2019: итоги, вызовы, перспективы» (ОСМ-2019).

Традиционно открывая календарь строительных выставок Москвы, форум лучших российских производителей строительной индустрии стал одним из ключевых мероприятий отрасли. Производство строительных материалов — технологическая основа современного строительства. Развитие этой сферы определяет технический прогресс отрасли в целом.

Цель выставки:

• — развитие рынка отечественных строительных материалов и повышение конкурентоспособности отечественных товаропроизводителей строительной индустрии;
• — создание единого пространства для встречи представителей строительной отрасли, науки, инженерии и государственных структур для обсуждения вопросов развития стройиндустрии.

Выставка проводится ежегодно, начиная с 1999 года. Несмотря на непростую экономическую ситуацию, выставка ОСМ сохраняет уверенные позиции на выставочной карте России.

Прошедшую выставку ОСМ-2018 посетили 15 тыс представителей оптовой и розничной торговли, специалистов архитектурных, строительных и ремонтных организаций.

Живой интерес к экспозиции со стороны профессионалов, напрямую занятых в сфере строительства, связан с высокой насыщенностью представленных здесь современных технологий производства стройматериалов. В 2018 году в выставке приняли участие 230 компаний из 19 стран мира.

С 2016 года выставка проходит при всесторонней поддержке Министерства промышленности и торговли Российской Федерации. Это обусловлено тем, что она открывает широкие возможности для внутриотраслевой кооперации, содействует созданию инновационных решений и продуктов.

По мнению Министерства подобное взаимодействие способствует развитию всей стройиндустрии и помогает в реализации программы «Стратегии развития промышленности строительных материалов и индустриального домостроения до 2020 года».

В церемонии официального открытия выставки приняли участие:

• — Серватинский Павел Владимирович, директор Департамента металлургии и материалов Министерства промышленности и торговли Российской Федерации;
• — Ручьев Александр Валерьевич, председатель Совета Ассоциации НОПСМ, президент ГК «Основа»;
• — Херсонцев Алексей Игоревич, руководитель Федеральной службы по аккредитации Российской Федерации;
• — Котровский Дмитрий Михайлович, член Президиума, председатель Комитета по строительству «Опоры России», общественный представитель Уполномоченного при Президенте РФ по защите прав предпринимателей в сфере строительства;
• — Быков Владимир Александрович, управляющим делами Торгово-промышленной палаты РФ и другие официальные лица.

Выставочная экспозиция состоит из следующих тематических разделов:

• — стеновые материалы;
• — фасадные материалы, кровля;
• — ЛКМ и сухие строительные смеси;
• — элементы мощения;
• — изоляционные материалы;
• — упаковка и транспортировка грузов;
• — специализированная одежда;
• — ассоциации и общественные организации;
• — КЕРАМБРИКТЕХ.

Данный формат мероприятия позволит производителям строительных материалов наилучшим образом представить свою продукцию заинтересованным посетителям — целевой аудитории — «лицом к лицу».

Значительная часть этой аудитории имеет, как правило, полномочия закупать продукцию, тем самым компании, участвующие в выставке, расширяют географию продаж, а также укрепляет позиции среди конкурентов.

Обширная деловая программа, проходящая в рамках выставки «Отечественные строительные материалы», является немаловажным фактором ее успеха.

С каждым годом растет качественный уровень оформления экспозиций. Интересные конструктивные решения стендов, использование эффектных материалов и ландшафтных средств обеспечивают всей выставке дизайн, достойный оформления крупнейших международных мероприятий, проходящих в Москве.

По признанию многих участников и гостей, выставка ОСМ всегда отличается приятной, но при этом серьезной деловой атмосферой, внимательным отношением со стороны Организаторов к участникам и гостям выставки.

Выставка продолжит работу до 1 февраля 2019 года.

Источник: http://www.stroyorbita.ru/

Новости — завод «ЭКО» в Москве

Противопожарный сертификат клей PROFFIX 101 (REI 240)_2

18.06.2019

Посетите наш стенд на ОСМ 2019!

22.01.2019

Уважаемые клиенты и гости нашего сайта, приглашаем Вас посетить наш стенд № В103, расположенный в павильоне №7 на 20-й Специализированной выставке «Отечественные строительные материалы – 2019» проходящей в г. Москве, ЦВК «Экспоцентр» с 29 января 2019 года по 01 февраля. Будем рады видеть Вас и познакомить с нашей продукцией!

Поздравляем с Новым годом и Рождеством!

25. 12.2018

Коллектив компании ЭКО, в лице Генерального директора Галагаева И.В., поздравляет с наступающими праздниками всех партнеров и гостей сайта.

Внимание!

10.07.2018

Участились случаи мошенничества!

Выставка WorldBuild Moscow / MosBuild 2018

13.03.2018

Приглашаем посетить стенд № G233 Павильон 2, зал 4 с нашей продукцией на выставке WorldBuild Moscow / MosBuild 2018. Выставка будет проходить с 3 по 6 апреля 2018 г.Москва, ЭкспоЦентр.

Выставка «ОСМ-2018»

16. 01.2018

Уважаемые клиенты, поздравляем Вас с Новогодними праздниками и приглашаем Вас посетить стенд с нашей продукцией на выставке «ОСМ-2018». Будем рады приветствовать Вас на стенде № В103, павильон №7!

Перемычка железобетонная

08.08.2017

У нас появилось новое изделие — перемычка железобетонная пустотная. Изготавливается из высококачественного тяжелого бетона класса В30 и В40. В качестве напряженной арматуры используется высокопрочная проволока диаметром 5 мм. Изделие выпускается с поперечным сечением 250×190, 250×220, 250×248 мм и соответствует ГОСТ.

Последние изменения в техническом регулировании и новые аспекты при проектировании и строительстве

28. 06.2017

Уважаемые коллеги и партнеры!

Выставка «Загородный дом 2016»

19.04.2016

Завод строительных материалов ООО «Эко» приглашает посетить выставку «Загородный дом 2016», которая пройдет с 22 по 24 апреля в КЗЦ «Миллениум» по адресу: Которосльная набережная, 53

Выставка «Вся недвижимость и стройка»

14.04.2016

Завод строительных материалов ООО «Эко» приглашает посетить выставку «Вся недвижимость и стройка», которая пройдет с 15 по 16 апреля в ТК «Старый город» по адресу: ул. Большая Октябрьская, д. 30а.

Список концертов и выступлений — Адам Джонсон

Адамс: Короткая поездка в быстрой машине (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г. )

Albeniz: Asturias (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Андерсон: Поездка на санях (ESO, декабрь 2015-2017) (CPO, 6 выступлений, декабрь 2013/14)

Андерсон: Waltzing Cat (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-6 ноября 2014 г.)

Абреу / обр.Золото: Tico Tico (OSM, 4 концерта, июль 2017 г.) (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Бах: 3-я Оркестровая сюита ре мажор (Оркестр Монреальской консерватории, Place des Arts и зал Жан-Эда, Монреаль, 30 сентября, ^-е, , 1 октября, ^-е, 2007) Air only (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 октября (2 выступления) и 17, 2013 г.)

Бах / обр. Steinberg: Chaconne (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 25 апреля 2015 г.)

Бах / обр.Stokowski: Mein Jesu was fur Seelenweh (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 25 апреля 2015 г. )

Бах / обр. Stokowski: Sheep May Safely Graze (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 25 апреля 2015 г.)

Бах / обр. Стоковски: Токката и фуга ре минор (OSM, Maison Symphonique, 8, 9, 10, 11 апреля 2019 г.)

Баделт / обр. Rickets: Pirates of the Caribbean Suite (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Barber: Adagio (дебют основной серии OSM, Maison Symphonique, 3 выступления, 4-5 октября 2017 г.)

Bartok: Concerto for Orchestra, 1st mvmt (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г.) (провел всю репетиционную работу, заменив Кента Нагано, окт.2017)

Барток: Танцевальная сюита, ​​соч. 86а, IV. Molto tranquillo (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Барток: Музыка для струнных, p ercussion, and celesta, 4 ^th mvmt (OSM, Maison Symphonique, 8, 9, 10, 11 апреля 2019 г.)

Барток: Румынские народные танцы BB 76, II. Sash Dance (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.) I. Stick Dance (OSM, Maison Symphonique, ноябрь 2017 г.)7, 8, 9, 10, 13, 2016)

Bass: Gloria (CPO, Пресвитерианская церковь Грейс, 11-12 декабря 2015 г.)

Бетховен: Кориолановая увертюра (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Бетховен: Egmont Overture (OPMEM, Salle Pierre Mercure, октябрь 2012 г.)

Бетховен: Симфония № 2 (Симфонический оркестр Тандер-Бей, 3 концерта в западном Онтарио, март 2015 г.) (1-й мвмт, Оркестр Монреальской консерватории, публичный экзамен, 3 апреля 2008 г.)

Бетховен: Симфония №3, 2 и 3 mvmts (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 1, 2 февраля, 23 апреля 2017 г.)

Бетховен: Симфония № 4 (1-й мвмт) (Оркестр Монреальской консерватории, публичный экзамен, апрель 2009 г.)

Бетховен: Симфония № 5 (CPO, Medicine Hat, 14 мая 2014 г. )

Бетховен: Симфония № 5, 1 ^st mvmt (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 28 ноября 2015 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 19 октября 2015 г.)15, 16 (2 выступления) и 17, 2013)

Бетховен: Симфония № 6, мвмц 3,4,5 (CPO, Heritage Park, 1-2 июня 2016 г.)

Бетховен: Симфония № 7, 2nd mvmt (OSM, Maison Symphonique 3 выступления 26-28 марта 2018 г. 3 выступления 21-22 июля 2017 г.) (Orchester Symphonique de Québec, Grand Theatre, 2 выступления 24 марта 2018 г.) (OSM, 4 дополнительных выступления на открытом воздухе концерты июль 2017)

Бетховен: Симфония № 8, mvmts 2 и 4 (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г.)

Beintus: Sur le fleuve de la rivière Sumida (OSM, Maison Symphonique, ноябрь.7, 8, 9, 10, 13, 2016)

Béland: Episode X (OSM, Salle Claude Champagne, Université de Montréal, 12 апреля 2017 г.)

Belkin: Night Passages (OPMEM, Salle Pierre Mercure, март 2013 г. )

Belkin: Rag for Nermal (Symphonie de la Virée, Complexe Desjardins, 1 сентября 2018 г.)

Берлиоз: Symphonie Fantastique, Songe d’une nuit de sabbat (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 1, 2 февраля, 23 апреля 2017 г.)

Бернштейн: Увертюра к Кандиду (OSM, Maison Symphonique, ноябрь 2012 г.)30 августа 2017 г.) (OSM, Salle Claude Champagne, 13 апреля 2017 г.) (OSM, Pollack Hall, Университет Макгилла, 10 ноября 2016 г.)

Bernstein: Mambo (OSM, Maison Symphonique, 29 января — 1 февраля 2018 г.) (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г.)

Бернштейн: симфонических танцев из Вестсайдской истории (дебют основной серии OSM, Maison Symphonique, 3 выступления, 4-5 октября 2017 г.)

Бизе: Кармен Сюита No. 1 (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Бизе: Кармен Сюита No.2, Aragonaise (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Бизе: попурри Carmen Suites (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г. )

Бизе: Jeux d’enfants (OSM, Maison Symphonique, 12 мая 2019 г.)

Брамс: Венгерский танец № 1 (Симфонический оркестр Тандер-Бей, 3 концерта в западном Онтарио, март 2015 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 октября (2 выступления) и 17, 2013 г.)

Брамс / Шлеминг: Венгерский танец №5 (OSM (OSM, Parc Wilfird-Bastien, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля, 2019) (OSM, Maison Symphonique, 29 января — 1 февраля 2018 г.) (CPO, Jack Singer Concert Hall, 28 ноября 2015 г.) (CPO, Crystal Ballroom, Fairmont Palliser Hotel, 26 ноября 2015 г.)

Брамс / Шлеминг: Венгерский танец 6 ре-бемоль мажор (OSM, Parc Wilfird-Bastien, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля, 2019))

Брамс / Шлеминг: Венгерский танец №7 ля мажор (OSM, Parc Wilfird-Bastien, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля, 2019)

Брамс / Дворжак: Венгерский танец № 19 си минор (ESO, Winspear Center, 8 февраля 2018 г. )

Брамс / Дворжак: Венгерский танец № 20 ми минор (ESO, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Брамс / Дворжак: Венгерский танец № 21 ми минор (ESO, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Брамс: ул.Вариации Антони (Симфонический оркестр Саскатун, TCU Place, 22 ноября 2014 г.)

Брамс: Симфония № 3, соч. 90, 3-й квартал (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 1, 2 февраля, 23 апреля 2017 г.)

Брамс: Симфония № 4, соч. 98, 1-й мвмт (CPO, 5 информационных мероприятий, 13-16 октября 2015 г.)

Brasset: Nitassinan (OSM, Salle Claude Champagne, Université de Montréal, 12 апреля 2017 г.)

Бриттен: Князь пагод, Сюита, ​​соч.57 (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Chang: Northern Star (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.)

Шарпантье: Te Deum, H. 146: Prelude (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г. )

Chausson: Симфония си-бемоль мажор, соч. 20, 2 ^nd mvmt . (Школьный оркестр Пьера Монтё, июль 2009 г.)

Шопен: Концерт для фортепиано с оркестром ми минор (1-й микс) (Фестивальный оркестр Банфа, Центр Банфа, авг.2005)

Claman: Hockey Night in Canada Theme (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-7 февраля 2014 г.)

Copland: Rodeo, Corral Nocturne and Hoe-Down (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Copland: Rodeo, Hoe-Down (струнная версия) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-7 февраля 2014 г.)

Дебюсси: Children’s Corner Suite, Golliwog’s Cakewalk (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 25 мая 2014 г.)

Дебюсси: Детский уголок, Снег танцует (CPO, 6 выездных концертов, ноябрь.2014)

Дебюсси: Клэр де Люн (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 28 ноября 2015 г.) (CPO, Crystal Ballroom, Fairmont Palliser Hotel, 26 ноября 2015 г. )

Дебюсси: Dialogue du vent et de la mer (OSM, Maison Symphonique, 11, 12, 13 апреля 2017 г.)

Дебюсси: Iberia из Images pour orchester (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Дебюсси: Interlude 1 de Pelleas et Mélisande (OSM, Maison Symphonique, 12 мая 2019 г.)

Дебюсси: Prélude à l’après-midi d’un faune (OPMEM, Salle Pierre Mercure, март 2013 г.)

Де Фалья: La Vida Breve, Danse Espagnole (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.) (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г.)

Delibes: Les filles de Cadix (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г.)

Доницетти: Линда ди Шамони «O Luce di quest anima» (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г.)

Дворжак: Концерт для виолончели, соч.104, 1st mvmt (OSM, Кэмерон Крозман, виолончель, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.) (ESO, Рафаэль Хукман, виолончель, Winspear Center, 8 февраля 2018 г. )

Дворжак / Моравец: Юмореска, соч. 101 нет. 7, об. для скрипки, виолончели и оркестра (ESO, Роберт Учида и Рафаэль Хукман, солисты, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Дворжак: Концерт для фортепиано с оркестром соль минор, соч. 33 (Сара Дэвис Бюхнер, фортепиано. Symphony Nova Scotia, Театр Rececca Cohn, 4 апреля 2019 г.)

Дворжак: Романс для скрипки, соч.11 (ESO, Роберт Учида, скрипка, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Дворжак: Скерцо каприччиозо, соч. 66 (ESO, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Дворжак: Серенада для струнных, соч. 22. No. 2 Valse (Оркестр Горацио Алжира, Chalet Mont Royal, 2 октября 2019 г.)

Дворжак: Славянский танец, соч. 46, нет. 1 (ESO, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-7 февраля 2014 г.)

Дворжак: Славянский танец, соч.46, нет. 8 (CPO, Heritage Park, 1-2 июня 2016 г.) (CPO, Saddledome, 3-5 июля 2015 г. )

Дворжак / Моравец: Славянский танец No. 10, соч. 72 нет. 2, об. для скрипки, виолончели и оркестра (ESO, Роберт Учида и Рафаэль Хукман, солисты, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Дворжак: Славянский танец No. 15, соч. 72 нет. 7 (ESO, Winspear Center, 8 февраля 2018 г.)

Дворжак: Песня на Луну из Русалка (ESO, Уитни Слоун, сопрано, Winspear Center, фев.8, 2018)

Дворжак: Симфония № 9, указ. 95 «Новый мир» (Симфонический оркестр Гвельфов, River Run Center, 26 октября 2019 г.) 4 ^th mvmt (Эдмонтонский симфонический оркестр, 8 февраля 2018 г.) (OSM, Maison Symphonique, 30 ноября 2017 г.) (OSM, Maison Symphonique, 25 сентября 2016 г.) (CPO, 6 выездных концертов, ноябрь 2014 г.)

Дворжак: Концерт для скрипки, соч. 53 (OSM, Керсон Леонг, соло. Maison Symphonique, 25 сентября 2016 г.)

Elfman: Simpsons Theme (CPO, 5 информационных выступлений, окт. 13-16, 2015)

Элгар: Концерт для виолончели (mvmts 1 и 2) (Оркестр Монреальской консерватории, публичный экзамен, 3 апреля 2008 г.)

Элгар: Марш помпезности и обстоятельств. 1 (CPO, Saddledome, 3-4 июля 2015 г., концертный зал Джека Сингера, 5-7 февраля 2014 г.)

Эркин: Кочекче, Сюита для оркестра (OSM, Парк Уилфирд-Бастьен, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля, 2019)

Estacio: Trumpet Concerto (дебют основной серии OSM, Maison Symphonique, 3 выступления, 4-5 октября 2017 г.)

Evangelista: Airs d’Espagne (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, ноябрь.26-29, 2017)

Fauré: Requiem (участники хора OSM и OSM, ноябрь 2017)

Ferro: Espaces Éphémères (OSM, Поллак-холл, Университет Макгилла, 10 ноября 2016 г.)

Гершвин: Американец в Париже (OSM, Parc Wilfrid-Bastien, Blainville Centre Équestre, Brossard Parc Sorbonne, 23-25 ​​июля 2019 г. ) (Orchester du Conservatoire de Musique de Montréal, ноябрь 2019 г.)

Gershwin: Rhapsody in Blue (OSM, Чарльз Ришар-Амлен, фортепиано, Maison Symphonique, ноябрь 2012 г.)30 2017)

Гершвин / обр. Sayre: Gershwin in Concert (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Герсвин: Прогулка с собакой, обр. для кларнета с оркестром (OSM, Тодд Коуп, кларнет, Maison Symphonique, 15 ноября 2017 г.)

Glass: Company (1983) (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.)

Григ: Holberg Suite (Оркестр Горацио Алджера, Chalet Mont Royal, 2 октября 2019 г.) (члены OSM, 15 октября 2017 г.)

Григ: Пер Гюнт, Suite no.1, Morning Mood (CPO, Heritage Park, 1-2 июня 2016 г.) (CPO, 5 выездных концертов, октябрь 2015 г.)

Григ: Пер Гюнт, Suite no. 1, В Зале Горного Короля (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 1, 2 февраля, 23 апреля 2017 г.)

Горецки: Концерт для валторны (Звукосниматель, Университет Альберты, 2001)

Гуле: Citius, Altius, Fortius (Symphonie de la Virée, 10 августа 2019 г. ) (OSM, Maison Symphonique, 8-11 апреля 2019 г.)

Гуле: Симфонический аэробный танец (Симфония Вире, сентябрь.1, 2018, Complexe Desjardins)

Гуно: Marche funèbre d’une marionette (OSM, Maison Symphonique, 12 мая 2019 г.)

Григ: В Зале Горного Короля (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 13-14 ноября 2013 г.)

Guarnieri: Dansa Brasileira (CPO, Bella Concert Hall, май 2016)

Guarnieri: Dansa Negra (CPO, Bella Concert Hall, май 2016)

Handel : Alleluia Chorus from Messiah (CPO and CPO Chorus, CORE Center, ноябрь.26, 2013)

Гайдн: Симфония фа минор, no. 45 «Прощание» (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 8 апреля 2017 г.) (Симфонический оркестр Саскатун, TCU Place, 22 ноября, ^nd , 2014)

Гайдн: Симфония соль минор, no. 83 (Оркестр Монреальской консерватории, Зал Пьер-Меркюр, Монреаль, 28 октября, ^-е, , 2008 г.).

Гайдн: Симфония № 101, 4-й квартал (OSM, Maison Symphonique, 25 сентября 2016 г. )

Hayes: Gloria (CPO, с мужским хором Калгари и Cum Vino Cantus, пресвитерианская церковь Грейс, дек.12-13 (3 выступления))

Хендрикс / Бахманн: Purple Haze (CPO, 5 информационных выступлений, 13-16 октября 2015 г.)

Hétu: Sur les rives du Saint-Maurice (Symphonie de la Virée, Complexe Desjardins, 10 августа 2019 г.)

Holst: The Planets (Симфонический оркестр Труа-Ривьер, 3 ноября 2018 г.). Марс (Симфония Вирэ, 10 августа 2019 г.)

Оттенок: Портрет чернил (OSM, Поллак-холл, Университет Макгилла, ноябрь 2015 г.)10, 2016)

Ingalls: Ave Maria (премьера в Северной Америке, CPO, пресвитерианская церковь Грейс, 11-12 декабря 2015 г.)

Jenkins: Palladio, 1 ^st mvmt (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-7 февраля 2014 г.)

Joplin: The Entertainer (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Кандер: Medley from Chicago (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 (2 выступления) и 17 октября 2013 г. )

Хачатурян: Танец с саблями (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Ким, Доюн: Vintage Machines (OSM, Поллак-холл, Университет Макгилла, ноябрь 2017 г.)10, 2016)

Korngold: Robin Hood Suite (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г.)

Kosma: Baptiste Suite из Enfants du Paradis (OSM, Maison Symphonique, 12 мая 2019 г.)

Лагуна: Симфония № 1 «La Liberté», 4-й квартал (OSM, Salle Claude Champagne, Université de Montréal, 12 апреля 2017 г.)

Lesage: Ощущения сбивают с толку (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Лессард, Даниэль: «L’Astronote» (Симфонический оркестр Труа-Ривьер, Пьер Родитель, губная гармошка, Стефан Демерс, рассказчик, ноябрь 2010 г.)3, 2018)

Ligeti: Concert Romanesc (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Лист: Легенда No. 2: Святой Франциск Паола (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 25 апреля 2015 г. )

Лист: Концерт для фортепиано с оркестром No. 1 (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 28 ноября 2015 г.)

Малер: Симфония № 1, 3 ^rd mvmt (отрывок) (OSM, Maison Symphonique, 8, 9, 10, 11 апреля 2019 г.)

Малер: Адажио, Симфония №5 (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября 2013 г.)

Маркес: Данзон нет. 2 ( OSM, Maison Symphonique, 29 января — 1 февраля 2018 г., Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г.)

Martinu: Двойной концерт для двух струнных оркестров, фортепиано и литавр (3 ^rd mvmt) (Школьный оркестр Пьера Монтё, июль 2009 г.)

Мендельсон: Es ist Genug из Elijah (Оркестр Монреальской консерватории, публичный экзамен, апрель 2009 г.)

Мендельсон: Увертюра «Гебриды» (OSM, Maison Symphonique, сен.25, 2016) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 13-14 ноября 2013 г.)

Мендельсон: Сон в летнюю ночь, свадебный марш (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г. )

Мендельсон: Симфония № 3 «Шотландский» 2 ^nd mvmt Scherzo (CPO, 6 выездных концертов, ноябрь 2014 г.)

Мендельсон: Симфония № 4 «Итальянский», 1-й квартал (OSM, Maison Symphonique, 18-22 ноября 2018 г.)

Мендельсон: Концерт для скрипки с оркестром ми минор, 1-й номер (OSM, Тимоти Чой, солист, Санкт-Петербург).Eustache, 24 августа 2018 г.)

Моцарт: Концерт для фагота, K. 191 (CPO, Кристофер Сейлз, соло. Концертный зал Джека Сингера, 6 и 8 апреля 2017 г.)

Моцарт: Концерт для кларнета, K.622, 3rd mvmt (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г.)

Моцарт: Eine kleine Nachtmusik, 1 ^st mvmt (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Моцарт: Немецкий танец, К. 571 No. 6 (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-7 февраля 2014 г.)

Моцарт: Увертюра «Волшебная флейта» (OSM, Maison Symphonique, сен.25, 2016)

Моцарт: Концерт для фортепиано с оркестром № 21, К. 467 (Саскатунский симфонический оркестр, Томас Ю., соло. TCU Place, 22 ноября 2014 г.)

Моцарт: Концерт для фортепиано с оркестром № 23, К. 488 (главный исполнительный директор, Чарльз Ришар-Амлен, солист. Концертный зал Джека Сингера, 8 апреля 2017 г.)

Моцарт: Симфония № 41 (1 ^st mvmt) (Оркестр Монреальской консерватории, Общественный экзамен, 1 апреля 2007 г.)

Моцарт: Увертюра к опере «Свадьба Фигаро», К.492 (CPO, Heritage Park, 1-2 июня 2016 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 15, 16, 21 марта 2015 г.) (CPO, Medicine Hat, 14 мая 2014 г.)

Моцарт: Концерт для скрипки № 4 (Пикап-ансамбль для сольного концерта, Зал Клода Шампань, Монреаль, 27 сентября, ^-е, 2008 г.)

Мусоргский: Ночь на Лысой горе (OSM dans les Parcs, 23-25 ​​июля 2019 г.) (OSM, Maison Symphonique 3 выступления 26-28 марта 2018 г. 3 выступления 21-22 июля 2017 г.) (Orchester Symphonique de Québec , Большой театр, 2 спектакля 24 марта 2018 г. )

Мусоргский: Картинки с выставки отрывка (OSM, Maison Symphonique, ноябрь 2012 г.)19-22, 2019) (Symphonie de la Virée, 4 сентября 2018 г.) (CPO, 6 информационных концертов, ноябрь 2014 г.)

Оффенбах: Увертюра к «Орфею в подземном мире» (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г., Концертный зал Джека Сингера, 25 мая 2014 г.)

Orff: Carmina Burana (CPO and Chorus, Детский хор Cantare, Тайлер Дункан, Мирей Асселин, Тим Шанц, Концертный зал Джека Сингера, 25 апреля 2015 г.)

Part: Fratres (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, ноябрь.26-29, 2017)

Пирс: Whirly, Концерт для квартета ударных и оркестра (Мировая премьера, OSM, Maison Symphonique, 29 января — 1 февраля 2018 г.)

Penido: Leurs Derniers Pas (OSM, Salle Claude Champagne, Université de Montréal, 12 апреля 2017 г.)

Piazzolla: Oblivion (переложение для кларнета с оркестром, OSM, 4 концерта, июль 2017 г. ) (переложение для фагота с оркестром, CPO, 2 концерта, апрель 2017 г.)

Piazzolla: The Seasons, 1.Лето , Керсон Леонг, скрипка (OSM, Parc Wilfird-Bastien, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля, 2019)

Пуленк: Les biches Suite, V. Final (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Пуленк: Мальвина, Le bal masqué (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Прокофьев: Золушка, II. Midnight (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Прокофьев: Петр и волк (OSM, Maison Symphonique, янв.29, 30, 31, 2019) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 5-6 ноября 2014 г.)

Прокофьев: Симфония No. 1 (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.)

Прокофьев: Симфония No. 5, II. Allegro marcato (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Рахманинов: Симфония №2, 2-й квартал (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г. )

Рамо: Балетная сюита, ​​III. Tambourin de Fêtes d’Hébé (OSM, Maison Symphonique, апр.8, 9, 10, 11, 2019)

Ravel: Alborada del Gracioso (дебют основной серии OSM, Maison Symphonique, 3 выступления, 4-5 октября 2017 г.)

Равель: Болеро (OSM, Parc Wilfird-Bastien, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля, 2019) (OSM, 4 концерта, июль 2017)

Равель: Ma Mère l’Oye (Мать Гусь), полный балет (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 25 мая 2014 г.)

Равель: Выдержки из Ma Mère l’Oye (OSM, St.Eustache, 1 сентября 2018 г.)

Равель: Лайдронетта, Императрица пагод из «Mother Goose Suite » (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 (2 выступления) и 17 октября 2013 г.)

Равель: Le jardin féerique, Mother Goose Suite (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Равель: L’enfant et les sortilèges, «Arrière, je réchauffe les bons» (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г. )

Равель: Ундина из Гаспара де Нюи (OSM, Maison Symphonique,

Richardson: The Sleeping Giant (CPO, Концертный зал Джека Сингера, ноябрь.13-14, 2013)

Ravel: Vocalise en forme de habanera (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Respighi: La boutique fantasque, Tarantella (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Revueltas: Redes, часть II (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Римский-Корсаков: Flight of the Bumblebee (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 4-6 февраля 2015 г., 5-7 февраля 2014 г.)

Римского-Корсакова: Шахерезада (отрывки, OSM, Maison Symphonique 3 выступления 26-28 марта 2018 г.).3 выступления 21-22 июля 2017 г.) (Симфонический оркестр Квебека, Большой театр, 2 выступления 24 марта 2018 г.)

Россини: Севильский цирюльник, увертюра (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 28 ноября 2015 г. )

Россини: Тема с вариациями для кларнета (OSM, 4 концерта, июль 2017)

Россини: Увертюра Вильгельма Телля ( Финал: Симфонический оркестр Тандер-Бей, 3 концерта в западном Онтарио, март 2015 г.) ( Полная увертюра: CPO, Концертный зал Джека Сингера, сентябрь.12, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 октября (2 выступления) и 17, 2013. OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г.)

Rota: Love Theme из The Godfather (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 октября (2 выступления) и 17, 2013 г.)

Сен-Санс: Carnaval des Animaux (Фестивальный оркестр Банфа, Банф-центр, 5 августа 2008 г.)

Сен-Санс: Концерт № 2 соль минор для фортепиано с оркестром, соч.22 (CPO, Medicine Hat, 14 мая 2014 г.)

Сен-Санс: Гаванез, соч. 83 , Керсон Леонг, скрипка (OSM dans les Parcs, 23, 24, 25 июля 2019 г.)

Saint-Saens: Prelude to Oratoire de Noel (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г. )

Сен-Санс: Симфония № 3, Maestoso (OSM, Maison Symphonique, 8, 9, 10, 11 апреля 2019 г.)

Satie: Parade from Acrobats (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Сати обр.Пуленк: Gnossienne no. 3 (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г.)

Schoenberg: Pierrot Lunaire (музыканты OSM и Патриция Копатчинская, 1 сентября 2018 г.)

Шуберт: Увертюра Розамунд, соч. 26 (OPMEM, Salle Pierre Mercure, ноябрь 2012 г.)

Шуберт: Симфония № 8, «Unfinished» (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г. (1 ^st mvmt)) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 6 и 8 апреля 2017 г. (завершено))

Шостакович: Симфония №10, 2nd mvmt (OSM, Maison Symphonique 3 выступления 26-28 марта 2018 г. 3 выступления 21-22 июля 2017 г.) (Симфонический оркестр Квебека, Большой театр, 2 выступления 24 марта 2018 г.)

Сибелиус: Финляндия, соч. 26 (Симфонический оркестр Гвельфов, River Run Center, 26 октября 2019 г.) (Symphonie de la Virée, 4 сентября 2018 г.) (OSM, Maison Symphonique, 1 мая 2017 г.) (CPO, 5 информационных выступлений, 13 октября -16, 2015)

Сибелиус: Концерт для скрипки, соч. 47 (первый mvmt) (OPMEM, Salle Pierre Mercure, сен.2012)

Сметана: Танец комиков (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 1, 2 февраля, 23 апреля 2017 г.) (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г.)

Smetana: Die Moldau (OSM, Maison Symphonique, 29 января — 1 февраля 2018 г.) (OSM, Maison Symphonique 3 выступления 26-28 марта 2018 г. 3 выступления 21-22 июля 2017 г.) (Orchester Symphonique de Квебек, Большой театр, 2 спектакля, 24 марта 2018 г.) (CPO, Heritage Park, 1-2 июня 2016 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, ноябрь.28 ноября 2015 г.) (CPO, Crystal Ballroom, Fairmont Palliser Hotel, 26 ноября 2015 г.)

Штраус-младший: An der schonen blauen Donau, op. 314 (OSM, 4 концерта, июль 2017 г.) (Симфонический оркестр Тандер-Бей, 3 концерта в западном Онтарио, март 2015 г.) (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Штраус-младший: Летучая мышь «Mein Herr Marquis» (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г.)

Штраус-младший: Увертюра к фильму «Летучая мышь» (CPO, Концертный зал Джека Сингера, ноябрь.28 ноября 2015 г.) (CPO, Crystal Ballroom, Fairmont Palliser Hotel, 26 ноября 2015 г.)

Strauss Jr .: Tritsch Tratsch Polka Op. 214 (CPO, Southern Jubilee Auditorium, 1 мая 2016 г.)

Штраус-младший: Unter Donner und Blitz, op. 324 (CPO, Heritage Park, 1-2 июня 2016 г.) (члены CPO, Saddledome, 3-5 июля 2015 г.)

— Несколько польок и маршей Штрауса-младшего и старшего (члены CPO, Saddledome, 3-5 июля 2015 г. и 8-10 июля 2016 г.)

Стравинский: Firebird Suite отрывка (Symphonie de la Virée, сент.4, 2018) (OSM, Maison Symphonique, 7, 8, 9, 10, 13 ноября 2016 г. ) (OSM, Pollack Hall, Университет Макгилла, 10 ноября 2016 г.) (CPO, 6 информационных концертов, ноябрь 2014 г.)

Стравинский: Октет (Симфония Новой Шотландии, Театр Речекки Кона, 4 апреля 2019 г.)

Стравинский: Сюита № 2, IV. Galop (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Такемицу: Dreamtime (OSM, Maison Symphonique, 4 выступления, 26-29 ноября 2017 г.)

Чайковский: 1812 Overture (CPO, Концертный зал Джека Сингера, ноябрь.28, 2015)

Чайковский: Концерт для фортепиано с оркестром No. 1 си минор, соч. 23 (OPMEM, Salle Pierre Mercure, январь 2013 г.)

Чайковский: Полонез из «Евгения Онегина» соч. 24 (CPO, Saddledome, 3-5 июля 2015 г.)

Чайковский: Фэнтези-увертюра «Ромео и Джульетта» (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г., Сент-Юсташ, 24 августа 2018 г.)

Чайковский: Серенада для струнных, соч. 48 (Оркестр Горацио Алжира, Шале Mont Royal, окт. 2, 2019) (Симфония Новой Шотландии, Театр Ребекки Кон, 4 апреля 2019 г.) No. 2, Valse (Члены OSM, Maison Symphonique, 15 октября 2017 г.) (CPO, Heritage Park, июнь 2015 г.)

Чайковский: Сюита № 3 соль мажор, соч. 55 (mvmt 4, Theme and Variations) (Школьный оркестр Пьера Монтё, июль 2009 г.)

Чайковский: Лебединое озеро, Danse Napolitaine (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Чайковский: Симфония № 1, 1st mvmt (CPO, Концертный зал Джека Сингера, ноябрь.13-14, 2013)

Чайковский: Симфония № 4, 4 ^th mvmt (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.) 3-й mvmt (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 1, 2 февраля, 23 апреля 2017 г.)

Чайковский: Симфония № 5, 4 ^th mvmt (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 октября (2 выступления) и 17, 2013 г.)

Чайковский: Симфония № 6, 3-й мвмт (CPO, 5 выездных выступлений, окт. 13-16, 2015)

Чайковский: Valse des Fleurs (OSM, Maison Symphonique, 11 апреля 2019 г.) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, декабрь 2018 г.) (ESO, Winspear Center, декабрь 2016 г., декабрь 2017 г., декабрь 2018 г.) ( OSM, Maison Symphonique, 25 сентября 2016 г.)

Tomasi: Концерт для тромбона (дебют основной серии OSM, Maison Symphonique, 3 выступления, 4-5 октября 2017 г.)

Веласкес / обр. Bratt: Besame Mucho (CPO, Heritage Park, 5-6 июня 2014 г.)

Верди: Увертюра к La Forza del Destino (OSM, 4 концерта, июль 2017)

Верди: Увертюра к Набукко (OSM, Maison Symphonique, сен.25, 2016)

Вивальди: Концерт для фагота F. VIII no. 35 (дирижирует с клавесина, OPMEM, Salle Pierre Mercure, сентябрь 2012 г.)

Вивальди: Magnificat (CPO, с мужским хором Калгари и Cum Vino Cantus, пресвитерианская церковь Грейс, 12-13 декабря (3 выступления))

Wagner: Ride of the Valkyries (OSM, 4 концерта, июль 2017 г. ) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 12 сентября, различные площадки, 19 сентября, 15, 16 октября (2 выступления) и 17, 2013 г.) )

Вагнер: Зигфрид Идиллия (Камерные игроки CPO, ноябрь.2014 г., Оркестр Монреальской консерватории, Общественный экзамен, апрель 2009 г.)

Вагнер: Тристан и Изольда, Либестод (OSM, Parcs Sorbonne et Jarry, 4 и 10 июля 2018 г.)

Webber, A.L .: Phantom of the Opera Suite (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г.)

Walton: Концерт для альта (Симфонический оркестр Гвельфов, River Run Center, 26 октября 2019 г.)

Weber: Oberon Overture (CPO, Концертный зал Джека Сингера, фев.5-7, 2014)

Webern: , 6 частей, Op. 6, вып. 5 Sehr langsam (OSM, Maison Symphonique, 19, 20, 21, 22 ноября 2018 г.)

Weinzweig: «Barn Dance» из «Красного кукурузного початка» (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 13–14 ноября 2013 г.)

Уильямс: Гарри Поттер и философский камень: детская сюита (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г. )

Williams: Theme from Jurassic Park (CPO, 5 информационных выступлений, 13-16 октября 2015 г.) (CPO, Southern Alberta Jubilee Auditorium, 1 мая 2016 г.)

Уильямс: Основная тема из «Звездных войн» (OSM, 4 cnocerts, июль 2017 г.) (OSM, Maison Symphonique, 30, 31 января, 2017 г.)1, 2, 23 апреля, 1 мая 2017 г.) (CPO, Heritage Park, 10-11 июня 2015 г., 6 выездных концертов, ноябрь 2014 г.)

Уильямс: Сюита «Звездные войны», 1. Основная тема, 2. Тема принцессы Леи 3. Тронный зал и финальные титры (Симфонический оркестр Труа-Ривьер, 3 ноября 2018 г.)

Уильямс: «Марш разбойников» из «В поисках утраченного ковчега» (Парк наследия, 1-2 июня 2016 г.)

Plamondon Symphonique (OSM, Maison Symphonique, 11 февраля 2019 г.)

Geneviève Leclerc Symphonique (Симфонический оркестр Труа-Ривьер, Salle Roy Thompson, дек.14, 2019)

Рене Клод, La mémoire du cœur (Изабель Буле, Клеманс Дерошер, Люс Дюфо, Луиза Форестье, Кэтлин Фортин, Анни Вильнев, Катрин Мажор, Ариан Моффатбер, Мари Дениз-Этель, Voix Boreales. 138 музыкантов на сцене. OSM, Maison Symphonique, 15 ноября 2019 г.)

L’OSM dans les Parcs (OSM, Парк Уилфирд-Бастьен, 23 июля, Blainville Centre Équestre, 24 июля, Brossard Parc Sorbonne, 25 июля 2019 г.)

L’Odyss ée musicale du jeux vidéo, 100% Québecois au Théatre St.Denis (8 ноября 2018 г.)

L’OSM dans les Parcs (OSM, Parc Sorbonne 4 juillet, Parc Jarry, 10 июля 2018 г.)

Andr é Sauvé et l’OSM (OSM , Maison Symphonique, 3 выступления 26-28 марта 2018 г. (OSM, Maison Symphonique, 3 выступления 21-22 июля 2017 г.)

André Sauvé et l’OSQ (Orchester Symphonique de Québec, Grand Théâtre de Québec, 2 выступления 24 марта 2018 г.)

50 ans des GEGEPS, avec Koriass, Yann Perreau, Philippe Brach, Vincent Vallières, Catherine Major и Charles Richard-Hamelin (OSM, ноябрь 2016 г.)30, 2017)

Half Moon Run (OSM, 26-27 сентября 2017 г.)

L’OSM dans les Parcs (OSM, Blainville, Brossard, Terrebonne, Montréal, 25-28 июля 2017 г. )

Calgary Stampede Heavy Horse Show (участники CPO, Saddledome, 6-9 июля 2017 г. и 8-10 июля 2016 г.)

Группа клуба одиноких сердец St. Pepper’s Lonely Hearts Club с The Art of Time Ensemble (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 3 марта 2016 г.)

Peking Acrobats (CPO, Концертный зал Джека Сингера, фев.6, 2016)

Rufus Wainright Live in Concert (CPO, Jubilee Auditorium Северной Альберты, 13 января 2016)

Holiday Family Pops (3 хора и оркестра, CPO, концертный зал Джека Сингера, 16 декабря, 2016) 2015)

Best of Billy Joel and Elton John (Jeans n ‘Classics) (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 17 октября 2015 г.)

Stayin’ Alive — Tribute to the Bee-Gees (CPO , Концертный зал Джека Сингера, 25-26 сентября 2016 г.)

Stayin ‘Alive — Tribute to the Bee-Gees (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 7 февраля 2015 г.)

Symphonic Pink Floyd: Dark Side of the Moon (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 28 января 2015 г. )

Легенды классического рока с Джоном Элефанте (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 16-17 января 2015 г.)

Традиционное Рождество ( Главный исполнительный директор с мужским хором Калгари и Cum Vino Cantus, пресвитерианская церковь Грейс, декабрь.12-13 (3 концерта), 2014)

Faithfully: A Tribute to Journey (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 1 ноября 2014 г.)

Kenny G (CPO, Концертный зал Джека Сингера, сент. 17, 2014)

Thriller: The Best of Michael Jackson (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 16-17 мая 2014 г.)

Led Zepplin: Stairway to Heaven (CPO, Концертный зал Джека Сингера, март. 12, 2014)

Rewind: Хиты 80-х с Шиной Истон и Сэмом Харрисом (CPO, Концертный зал Джека Сингера, янв.29, 2014)

Традиционное Рождество (CPO и Детский хор Cantare, пресвитерианская церковь Grace, 13-14 декабря (3 концерта), 2013)

Chantal Kreviazuk (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 11 декабря , 2013)

AC / DC Tribute: Back in Black (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 18 октября 2013 г. )

Концерт Диснея (CPO, Концертный зал Джека Сингера, 10-11 октября ( 3 выступления), 2013)

Барток: Концерт для оркестра (OSM, Maison Symphonique, вмешались в тот же день, чтобы отрепетировать всю работу в рамках подготовки к Карнеги-холлу, октябрь.15, 2017. Также дирижировал отрывками на сцене Карнеги-холла)

Бетховен: Концерт для фортепиано с оркестром № 1 (Симфонический оркестр Макгилла)

Бетховен: Концерт для фортепиано с оркестром No. 4 (OSM, Тилль Фелльнер, фортепиано)

Бетховен: Симфонии № 2, № 4, № 7 (Оркестр Национального центра искусств), № 8 (OSM) Увертюра Кориолана, Увертюра Леонора III

Дебюсси : Jeux (Симфонический оркестр Барселоны, март 2019 г.) (OSM, многочисленные проверки звука по всей Европе во время турне, март 2019 г.)

Dutilleux: Symphonie no.2 «Le Double» (OSM 2018)

Дворжак: Симфония No. 5 (OSM, 2019)

Fuchs: Серенада No 3, op. 21 (Violons du Roy)

Gershwin / Brubaker: Rhapsody in Blue (оркестровая аранжировка) (Симфонический оркестр Thunder Bay)

Моцарт: Дивертисмент си-бемоль мажор, K. 137 (Violons du Roy)

: Симфония № 41 (Симфонический оркестр Макгилла)

Мендельсон: Музыка из балета «Сон в летнюю ночь», соч.61 (Ноктюрн, Свадебный марш)

Сен-Санс: Концерт для фортепиано с оркестром № . 5 , Жан-Ив Тибо, фортепиано (OSM)

Шостакович: Симфония № 9 ми-бемоль мажор, соч. 70 (mvmts 3-5)

Stravinsky: Rite of Spring (Симфонический оркестр Барселоны, март 2019 г.) (OSM, многочисленные проверки звука по всей Европе во время турне, март 2019 г.)

Турина: Danzas Fastasticas, Op. 22 (1 ^st mvmt)

On Snow Magazine (OSM) SKI-DOO ОБЪЯВЛЯЕТ МОДЕЛЬНЫЙ ГОД 2019 ВЕСЕННИЙ ТУР — ВАШ ШАНС УВИДЕТЬ НОВЫЙ ЖЕЛЕЗ В ЧЕЛОВЕК

Весенний тур Ski-Doo 2019 приближается к вам! Не упустите свой первый шанс лично познакомиться с новой линейкой Ski-Doo 2019, аксессуарами и снаряжением для езды! На некоторых остановках также будет возможность покататься на новых санях. Многие остановки тура по Канаде будут проводиться в рамках тура Manufacturer’s Sneak Peek Tour, и в нем будут представлены все четыре производителя

.

КАНАДА

Agriplex Western Fair District, Лондон, ON; Четверг, 1 марта — с 16:00 до 21:00

Best Western — North Bay Hotel & Conference Center, North Bay ON, суббота, 3 марта — с 13:00 до 18:00

Hotel des Eskers, Amos QC, вторник, 6 марта — с 16:00 до 21:00

Hotel Le Montagnais , Chicoutimi QC, четверг, 8 марта — с 16:00 до 21:00

Centre Colombien de la Mitis, Mont-Joli QC, суббота, 10 марта — с 13:00 до 18:00

SNEAK PEAK — Bell Sensplex, Kanata ON, вторник, 13 марта — с 16:00 до 21:00 / среда, 14 марта — с 16:00 до 21:00

SNEAK PEAK — Complexe Capital Helicoptere, Quebec QC, пятница, 16 марта — с 14:00 до 21:00 / суббота, 17 марта — с 10:00 до 17:00

Centre de foires de Sherbrooke, Sherbrooke QC, воскресенье, 18 марта — с 13:00 до 18:00

SNEAK PEAK — Place Forzani, Laval QC, вторник, 20 марта — с 16:00 до 21:00 / среда, 21 марта — с 16:00 до 21:00

SNEAK PEAK — Eastview Arena , Barrie ON, пятница, 23 марта — с 16:00 до 21:00 / суббота, 24 марта — с 10:00 до 17:00

SNEAK PEAK — Red River Exhibition Park , Winnipeg MB, вторник, 27 марта — с 13:00 до 21:00

SNEAK PEAK — Prairieland Park , Saskatoon SK, четверг, 29 марта — с 13:00 до 21:00

SNEAK PEAK — Edmonton Expo Center , Edmonton AB, суббота, 31 марта — с 13:00 до 21:00

Delta Hotels Calgary South , Calgary AB, вторник, 3 апреля — с 16:00 до 21:00

СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ — ЗАПАД

ДЕМОНСТРАЦИОННОЕ СОБЫТИЕ — Выставка снегоходов и выставка Powersports , West Yellowstone MT, пятница, 9 марта — с 10:00 до 18:00 / суббота, 10 марта — с 9:00 до 18:00 / воскресенье, 11 марта — с 9:00 до 12:00

Mirabeau Park Hotel , Spokane WA, вторник, 13 марта — с 16:00 до 21:00

Holiday Inn Portland Airport , Портленд, Орегон, вторник, 15 марта — с 16:00 до 21:00

ДЕМО СОБЫТИЕ — Bear Creek Lodge , McCall ID, суббота, 17 марта — с 10:00 до 16:00

Конференц-центр Дэвиса , Layton UT, понедельник, 19 марта — с 16:00 до 21:00

Jackson Hole Hill Climb , Snow King Mountain WY, четверг, 22 марта — суббота, 24 марта — с 8:00 до 16:00 / воскресенье, 25 марта — с 9:00 до 16:00

Lamar Street Center , Arvada CO, вторник, 27 марта — с 16:00 до 21:00

ДЕМО СОБЫТИЕ — Tailgate Alaska, Thompson Pass AK, с четверга, 5 апреля по воскресенье, 8 апреля — весь день

Williwaw, Анкоридж, AK, вторник, 10 апреля — с 16:00 до 21:00

Парковка Walmart, Фэрбенкс, AK, четверг, 12 апреля — с 12:00 до 19:00

СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ — ВОСТОК

Days Hotel Allentown Airport, Lehigh Valley , Allentown PA, понедельник, 26 февраля — с 16:00 до 21:00

Общественный центр Огасты , Огаста Мэн, среда, 28 февраля — с 16:00 до 21:00

DEMO EVENT — SNODEO — Coleman State Park , Colebrook NH, пятница, 2 марта — с 9:00 до 16:00 / суббота, 3 марта — с 8:00 до 15:00

The Executive Court Banquet , Manchester NH, понедельник, 5 марта — с 16:00 до 21:00

Казино Саратога — Отель , Саратога-Спрингс, Нью-Йорк, среда, 7 марта — с 16:00 до 21:00

DEMO EVENT — SNOFEST — Hiltebrant Recreation Centre Pavillon , Old Forge NY, пятница, 9 марта — с 9:00 до 17:00 / суббота, 10 марта — с 9:00 до 17:00

Michael’s Catering and Banquets , Hamburg NY, понедельник, 12 марта — с 16:00 до 21:00

Frankenmuth Credit Union Event Center, официально известный как Expo Center , Birch Run MI, среда, 14 марта — с 16:00 до 21:00

ISOC Snocross Race Lake Geneva, Grand Geneva Resort & Spa WI, пятница, 16 марта — с 15:00 до 22:00 / суббота, 17 марта — с 10:00 до 22:00 / воскресенье, 18 марта — с 9:00 до 16:00

Comfort Suites Johnson Creek Conference Center, Johnson Creek WI, вторник, 20 марта — с 16:00 до 21:00

Central Wisconsin Expo Center , Wausau WI, среда, 21 марта — с 16:00 до 21:00

ДЕМО СОБЫТИЕ — ERX Motorsports , Elk River MN, суббота, 24 марта — с 9:00 до 15:00 / воскресенье, 25 марта — с 9:00 до 15:00

Mayo Civic Center , Rochester MN, среда, 28 марта — с 13:00 до 21:00

OSM-индуцированный CD44 способствует метастатическому потенциалу рака груди за счет отслоения клеток, но не эпителиально-мезенхимального перехода

Cancer Manag Res. 2019; 11: 7721–7737.

, ¹ , ^{2, 3} , ¹ , ¹ , ² , ¹ , ^{1, 2} и ^{1, 2}

Hunter Covert

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

Лилиана Ф. Меллор

² Государственный университет Бойсе, Департамент биологических наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

³ Oncología Molecular, Национальный центр онкологических исследований (CNIO), Мадрид, 28029, Испания

Коди Л. Вольф

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

Николь Анкенбрандт

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

Жаклин М. Эматингер

² Государственный университет Бойсе, Департамент биологических наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

Кен Тавара

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

Джули Том Оксфорд

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

² Государственный университет Бойсе, Департамент биологических наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

Cheryl L Jorcyk

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

² Государственный университет Бойсе, Департамент биологических наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

¹ Государственный университет Бойсе, Программа биомолекулярных наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

² Государственный университет Бойсе, Департамент биологических наук, Бойсе, штат Иллинойс, 83725, США

³ Oncología Molecular, Национальный центр онкологических исследований (CNIO), Мадрид, 28029, Испания

Для корреспонденции: Cheryl L Jorcyk Клинические / трансляционные исследования, биологические науки, программа биомолекулярных наук, Государственный университет Бойсе, Университетский проезд, 1910, SN-227, Бойсе, штат Иллинойс, 83725-1515, США, телефон: тел. + 1208 426 1040, электронная почта cjorcyk @ boisestate.edu

Поступило 14.03.2019; Принято 4 июля 2019 г.

Эта работа опубликована и лицензирована Dove Medical Press Limited. Полные условия этой лицензии доступны по адресу https://www.dovepress.com/terms.php и включают Некоммерческую лицензию Creative Commons Attribution (непортированная, v3.0) (http://creativecommons.org/licenses/ автор: NC / 3.0 /). Получая доступ к работе, вы тем самым принимаете Условия. Некоммерческое использование работы разрешено без дополнительного разрешения Dove Medical Press Limited при условии, что работа указана надлежащим образом.Для получения разрешения на коммерческое использование этой работы см. Параграфы 4.2 и 5 наших Условий (https://www.dovepress.com/terms.php). Эта статья цитировалась в других статьях PMC.

Дополнительные материалы

Рисунок S1: OSM индуцирует EMT в клетках MCF-7. Клетки опухоли молочной железы MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов. OSM вызывает усиление мезенхимального фенотипа, перераспределение экспрессии E-кадгерина (зеленый цвет, шкала на верхней панели — 20 нм) и небольшое снижение экспрессии α-катенина (зеленый цвет, шкала шкалы на нижней панели — 20 нм), как измерено с помощью иммунофлуоресценция (DAPI = синий).

Рисунок S2: OSM не влияет на различные уровни мРНК варианта CD44 в клетках рака груди ( A ) Клетки MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 0,5, 1, 4 и 8 часов. с последующим сбором РНК и анализом количественной ПЦР на CD44 (n = 3). ( B ) Клетки MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 8 часов с последующим сбором РНК и анализом qPCR для различных вариантов сплайсинга CD44. (n = 3).

Фигура S3: OSM-индуцированное расщепление CD44 снижается общим ингибитором MMP в ER + клетках опухоли молочной железы ( A ) Клетки T47D обрабатывали 10 нМ GM6001 (глобальный ингибитор MMP) в течение 48 часов перед добавлением OSM (25 нг / мл) в течение дополнительных 48 часов. Собирали лизаты целых клеток и проводили вестерн-блоттинг CD44 для наблюдения за продуктами расщепления. OSM индуцирует CD44 в клетках T47D через 48 часов; ингибирование активности ММП снижает индуцированное OSM расщепление CD44. ( B ) Количественное определение полос 15–35 кДа с помощью ImageJ демонстрирует, что GM6001 значительно снижает OSM-индуцированные продукты расщепления CD44 (n = 3) (* P <0,05, непарный t -тест). Изменение кратности рассчитывалось с использованием обработки без OSM в качестве исходного контроля по сравнению с обработкой OSM.GM6001 с кратным изменением OSM рассчитывали путем сравнения его с обработкой OSM в отсутствие GM6001.

Реферат

Предпосылки

Статус рецепторов гормонов в клетках рака груди человека является сильным индикатором агрессивности опухоли. Тройной негативный рак молочной железы (TNBC) агрессивен, трудно поддается лечению и способствует высокой частоте метастазирования, поскольку обладает такими характеристиками, как повышенная миграция опухолевых клеток и большое присутствие трансмембранного белка, кластер дифференцировки 44 (CD44) на клеточной мембране. .Клетки, положительные по рецепторам эстрогена (ER +), менее агрессивны и не мигрируют, пока не пройдут эпителиально-мезенхимальный переход (EMT).

Методы

Взаимосвязь между EMT и CD44 во время метастатических событий оценивается путем наблюдения изменений в маркерах EMT, отслоения опухолевых клеток и миграции после обработки цитокинами как родительских, так и CD44-нокдаун клеток опухоли молочной железы человека.

Результаты

Клетки рака груди человека ER + T47D и MCF-7, обработанные OSM, демонстрируют повышенную экспрессию CD44 и расщепление CD44.Напротив, клетки рака груди человека ER-MDA-MB-231 не обнаруживают изменения в экспрессии CD44 и не подвергаются ЕМТ в присутствии OSM. В клетках ER + нокдаун экспрессии CD44 с помощью shRNA не предотвращал EMT, но изменял метастатические процессы, такие как клеточное отслоение и миграция. OSM-индуцированная миграция была снижена как в ER +, так и в ER- клетках с клетками shCD44 по сравнению с контрольными клетками, в то время как стимулирование отслоения опухолевых клеток с помощью OSM было снижено в клетках ER + MCF7-shCD44 по сравнению с контрольными клетками. Интересно, что OSM-индуцированное отслоение в клетках ER-MDA-MB-231-shCD44, которые обычно не отслаиваются со значительной скоростью.

Заключение

OSM способствует как EMT, так и отслоению опухолевых клеток в ER + клетках рака молочной железы. Тем не менее, нокдаун CD44 не влиял на OSM-индуцированную EMT в этих клетках, при этом независимо уменьшая OSM-индуцированное отсоединение клеток. Эти результаты предполагают, что регуляция CD44 с помощью OSM важна, по крайней мере, для части метастатического каскада при раке молочной железы ER +.

Ключевые слова: эпителиально-мезенхимальный переход, Онкостатин М, кластер дифференцировки 44, метастазы опухоли молочной железы

Предпосылки

Основная причина смертности пациентов с раком молочной железы — не сама первичная опухоль, а ее метастазы. ^{1 — 4} Продолжение исследований метастазов рака молочной железы важно для улучшения выживаемости пациентов и лучшего понимания множества событий, которые происходят во время метастатического заболевания. Для того чтобы опухолевые клетки метастазировали, они должны претерпеть фенотипическое изменение, известное как эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП), которое позволяет интравазировать опухолевую клетку в ближайший кровеносный сосуд или лимфатический канал. ^{5 — 7} Как только клетки первичной опухоли молочной железы попадают в сеть сосудов, они подвергаются процессу самонаведения к определенным органам внутри тела, ^{8 , 9} , таким как кости, легкие, печень , и мозг. ^{10 — 18} Микроокружение опухоли (TME) играет важную роль в метастатическом каскаде, ¹⁹ и передача сигналов от цитокинов, присутствующих в TME, приводит к фенотипическим изменениям опухолевых клеток, необходимым для возникновения метастазов. ²⁰ Было показано, что воспалительные цитокины семейства интерлейкина-6 (IL-6), такие как онкостатин M (OSM), играют важную роль в управлении инвазией и метастазированием опухоли. ²¹

OSM представляет собой плейотропный цитокин семейства IL-6, который играет важную роль в воспалении, проявляющемся во время развития опухоли груди. ^{22 — 24} Опухолевые клетки, а также моноциты, макрофаги и нейтрофилы секретируют OSM. ²⁵ OSM активирует пути JAK / STAT, MAPK и PI3K / AKT посредством связывания своих рецепторов, рецептора OSM бета (OSMRβ) или рецептора фактора ингибирования лейкемии бета (LIFRβ), каждый из которых димеризуется с помощью общей субъединицы gp130. ^{21 , 26 , 27} Наши предыдущие данные и данные из литературы показали, что OSM подавляет пролиферацию клеток рака груди, увеличивая метастатическую способность. ^{28 , 29} OSM вызывает EMT, отслоение, миграцию клеток и общее повышение агрессивности опухолевых клеток. На белки и события, участвующие в метастазировании опухоли молочной железы, напрямую влияет передача сигналов OSM, что создает более агрессивный фенотип за счет активации белков, таких как CD44.

Кластер дифференцировки 44 (CD44) представляет собой трансмембранный белок, участвующий в адгезии и миграции клеток после того, как он подвергается расщеплению из-за протеолитической активности. ³⁰ Стандартный CD44 (CD44s) составляет примерно 80–85 кДа в зависимости от посттрансляционных модификаций. ^{31 — 33} CD44 содержит карбокси-концевую часть, известную как цитоплазматический хвост, и аминоконцевую часть вне мембраны, сложенные вместе за счет посттрансляционного гликозилирования. ^{34 , 35} CD44 является основным рецептором для связывания гиалуроновой кислоты (HA) во внеклеточном матриксе, ^{36 , 37} и связывает HA своей стебельной областью, которая находится непосредственно над поверхностью мембраны и включает домены, полученные из альтернативно сплайсированных экзонов. ^{38 , 39} Альтернативно сплайсированный CD44, такой как CD44v6, был обнаружен при нескольких типах рака, включая карциному желудка и головы и шеи. ^{40 , 41} В зависимости от структуры CD44 с его множественными комбинациями экзонов передача сигналов различается в зависимости от того, как она распознается вышестоящим лигандом. ^{42 , 43} Различные роли CD44 усложняют изучение белка. Сам белок не является потенциальной терапевтической мишенью по глобальной шкале нокдауна, потому что передача сигналов через CD44 имеет решающее значение для здоровья и функции многих различных клеток, включая Т-клетки, ⁴⁴ , в то время как другие показали потенциальную роль CD44 во время метастатических процессов, таких как ЕМТ.

CD44 состоит из 20 экзонов; 1–5 и 16–20 содержат CD44, тогда как 6–15 обеспечивают экзоны, которые способны подвергаться альтернативному сплайсингу. ^{45 — 47} Вариантные экзоны 6–15 обозначаются с v1, v2, v3 и т. Д. До v10, и существует множество изоформ вариантов CD44 (CD44v). ^{47 , 48} CD44v6 содержит только вариант экзона 6 плюс стандарт CD44 и связан с высокоагрессивными опухолями. ⁴⁹ CD44v3-10 содержит стандартные экзоны плюс вариантные экзоны v3-v10 и встречается реже, чем CD44v6. ⁵⁰ ER + клетки, обладающие эпителиальным фенотипом, демонстрируют CD44v8-10, известный как CD44E (эпителиальный CD44). ⁵¹ Независимо от комбинации экзонов, содержащих CD44v, экзоны из CD44 остаются, несмотря на альтернативный сплайсинг. ⁵²

Когда начинается метастатический процесс, экспрессия CD44 повышается, и белок CD44 расщепляется, что коррелирует в тех же временных рамках, что и EMT. ⁵³ Было показано, что ЕМТ и активация CD44 вместе участвуют в метастазировании опухоли молочной железы. ^{54 — 56} Корреляция между EMT и CD44 во время метастазирования была показана, поскольку стандартная форма CD44 становится доминирующей формой белка CD44, пока имеет место EMT. ⁵⁷ Прямая связь и время EMT и клеточного отслоения еще не связаны с экспрессией CD44. Было показано, что CD44 и CD44v являются сильными биомаркерами, обычно обнаруживаемыми в более высоком проценте более агрессивных популяций опухолей, ⁵⁸ , которые, как предполагается, ранее подвергались EMT. Хотя и CD44, и EMT участвуют в прогрессировании и метастазировании опухоли молочной железы, установление прямой связи между ними оказалось сложной задачей. Связь между CD44 и прогрессированием опухоли существует, поскольку высокая экспрессия CD44 считается отличительной чертой стволовых клеток рака груди (BCSC).

Раковые стволовые клетки представляют собой проблему во время лечения, поскольку они способны контролировать пролиферацию клеток. ⁵⁹ Экспрессия CD44 является важным маркером для идентификации BCSC в разнообразной популяции опухолевых клеток. ⁶⁰ Наиболее распространенной популяцией BCSC, изучаемой при раке груди человека, является CD44 ⁺ / CD24 ^{low / —} . Метастазы возникают из-за EMT, клеточной отслойки, миграции и, возможно, BCSCs, ускользающих от обычного терапевтического лечения.

В этом исследовании мы демонстрируем связь между метастатическими событиями, вызванными OSM, и CD44 во время отслоения и миграции опухолевых клеток. И EMT, и CD44 были связаны с метастазами, но возник вопрос, связаны ли они прямо или косвенно.Здесь мы предоставили данные, показывающие, что OSM индуцирует EMT и усиливает экспрессию CD44, но что OSM-индуцированная EMT не зависит от CD44. Напротив, мы показываем, что CD44 играет очень специфическую роль в вызванном OSM отслоении и миграции, обоих важных событиях в метастатическом каскаде, который следует за EMT. Более того, нокдаун CD44 в агрессивных клетках ER-TNBC способствует тому, что клетки ведут себя как менее агрессивные (ER + -подобные) клетки во время отсоединения. Эти данные подчеркивают еще один важный механизм того, как OSM вызывает метастатический потенциал рака груди.

Материалы и методы

Культура клеток и цитокиновая стимуляция

MCF7 и T47D ER + luminal Клетки рака молочной железы человека были получены непосредственно из Американской коллекции типовых культур (Роквилл, Мэриленд), содержащихся в среде RPMI-1640 с добавлением 10% плода. бычья сыворотка (FBS) и по 100 Ед / мл пенициллина и стрептомицина. Клетки поддерживали при 37 ° C, 5% углекислого газа и 95% влажности. Все среды и добавки были получены от Hyclone (Логан, Юта). Онкостатин М человека (OSM) (Peprotech, Rocky Hill, NJ) добавляли в концентрации 25 нг / мл. ^{61 , 62}

Иммунофлуоресцентное окрашивание и микроскопия

2,5 × 10 ⁵ клеток помещали на покровные стекла (Thermo Fisher Scientific). Через 24 часа клетки обрабатывали OSM или без него в течение 3 дней. После экспериментальной обработки клетки промывали один раз PBS, а затем фиксировали в ледяном метаноле в течение 20 минут. Клетки промывали 3 раза PBS в течение 10 минут. Клетки блокировали в PBSAT (1X PBS / 1% BSA / 0,5% Triton X-100) в течение 30 минут, а затем инкубировали в PBSAT, содержащем первичные антитела E-кадгерин человека (1: 200, как при иммуноблоттинге), α-катенин ( 1: 200; Abcam, Кембридж, Великобритания), фаллоидин вместо актина (1: 200, Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс) в течение ночи. Клетки промывали 3 раза в PBS и инкубировали с PBSAT, содержащим козьи антимышиные Alexa Flour 488 (1: 1000) и ослиные антикроличьи Alexa Flour 546 (1: 500; Molecular Probes, Invitrogen, Carlsbad, CA), вторичные антитела в течение 2 дней. часов Клетки промывали 3 раза PBS и устанавливали с помощью Prolong Gold DAPI (Molecular Probes). Для визуализации пятен и получения изображений конфокальной микроскопии использовали систему Zeiss LSM 510 Meta в сочетании с инвертированным микроскопом Zeiss Axiovert Observer Z1 и программным обеспечением для визуализации ZEN 2009 (Carl Zeiss, Inc., Торнвуд, штат Нью-Йорк).

КПЦР в реальном времени

Общую РНК собирали с использованием РНК STAT-60 и выделяли в соответствии с протоколом производителя (Tel-Test; Friendswood, TX). кДНК синтезировали в соответствии с протоколом производителя (набор для обратной транскрипции кДНК высокой емкости, Applied Biosystems, In / Life Technologies). LightCycler 96 (Roche Diagnostic Corporation, Индианаполис, Индиана) с программными настройками: 1 цикл преинкубации, 45 циклов двухэтапной амплификации и 1 цикл плавления с высоким разрешением; шаги были установлены на 95 градусов C в течение 120 секунд. Используемые праймеры показаны на. Для анализа данных использовали метод ΔΔCq, как описано Ливаком и Шмитгеном. ⁶³ Статистический анализ был выполнен с использованием программного обеспечения GraphPad Prism для односторонних тестов ANOVA.

Таблица 1 +

Список праймеров, используемых для кПЦР

ИМЯ +	5′ +	3′ +
CD44s	AGTCACAGACCTGCCCAATGCCTTT	TTTGCTCCACCTTCTTGACTCCCATG
CD44v2	GACAGCAACCAAGAGGCAAG	TTTGTGTTGTTGTGTGAAGATGATT
CD44v3	CGTCTTCAAATACCATCTCAGCA	ATCTTCATCATCAATGCCTGA
CD44v4	AACCACACCACGGGCTTT	CATCCTTGTGGTTGTCTGAAGTA
CD44v5	ATGTAGACAGAAATGGCACCAC	GTGCTTGTAGAATGTGGGGTC
CD44v6	GGCAACTCCTAGTAGTACAACG	GTCTTCTCTGGGTGTTTGGC
CD44v7	CTCATACCAGCCATCCAATGC	CTTCTTCCTGCTTGATGACCTC
CD44v8	CTCCAGTCATAGTATAACGCTTCA	GTTGTCATTGAAAGAGGTCC TGT
CD44v9	AGCAGAGTAATTCTCAGAGCTTC	CAGAGTAGAAGTTGTTGGATGGT
CD44v10	ATCATTCTGAAGGCTCAACTACTT	TAAGGAACGATTGACATTAGAGTTG
Слаг	AGAGACATGACGGTGGTTTGT	GTTTTGCACCCAGAAAGTGTGA
Улитки	GTAAGGGAGGAGGGGACAGG	CCCAGGACTCCAAAGCCCTA
β -Actin	AGAGCTACGAGCTGCCTGAC	AGCACTGTGTTGGCGTACAG

Вестерн-блот-анализ

Для лизатов цельных клеток 5 × 10 ⁴ клеток были засеяны в 24-луночные планшеты Scientificmo, если не указано иное. .В конце эксперимента планшеты промывали ледяным PBS, затем помещали на лед с 125 мкл буфера RIPA (Thermo Fischer Scientific) с добавлением 1: 100 коктейля из ингибиторов Sigma Protease Inhibitor и 1 мкл / мл фенилметилсульфонилфторида ( PMSF) (Sigma, Сент-Луис, Миссури) в течение 15 минут, перемешивая каждые 5 минут. Планшеты соскребали и содержимое переносили в пробирку Эппендорфа. Затем пробирки центрифугировали при 14000 об / мин в течение 20 минут.

Лизаты обрабатывали на 7,5-10% SDS-PAGE геле и переносили на нитроцеллюлозную мембрану.Иммуноблот-анализ проводили с использованием первичных антител к человеческому E-кадгерину (1: 2000), β-актину (1: 5 000), α-катенину (1: 2,500) (Cell Signaling Secondary, Danvers, MA), CD44 (1: 5000). ) (любезно предоставлено доктором Лилианой Меллор и доктором Кнудсоном). Антитела представляют собой конъюгированные с HRP ослиные антикроличьи антитела (1: 5,000).

Проточная цитометрия

Проточный цитометр FACSCaliburTM (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния) использовали для наблюдения популяций BCSC, присутствующих в однородной популяции. Клетки MCF-7 и T47D обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов перед проведением проточной цитометрии с использованием антител (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния) к CD44 (буфер FACS 1: 5), CD24 (FACS 1: 5). буфер), FITC (буфер FACS 1:50) и PE (буфер FACS 1:50) после блокирования клеток в течение 10 минут с помощью 1% BSA.Антитела связывались со своими соответствующими мишенями в течение 30 минут на льду в темноте. После инкубации клетки промывали 3 раза буфером FACS (10% FBS, 0,1% азида натрия в PBS). Программный анализ выполнялся с использованием программного обеспечения BD FACSCalibur: CellQuest Pro, версия 6.0, от BD Biosciences. Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения GraphPad Prism для односторонних тестов ANOVA.

трансдукция shRNA

Нокдаун гена CD44 и нецелевой контроль проводили с использованием лентивирусных конструкций shERWOOD shRNA (Transomic Technologies, Huntsville, AL).Вирусную трансдукцию клеток MDA-MB-231 luc и MCF-7 luc проводили в соответствии с протоколом производителя. Пуромицин использовали для первоначального отбора с последующей флуоресцентной микроскопией для выделения популяции трансдуцированных клеток. Экспрессию CD44 подтверждали Вестерн-блоттингом.

Анализ отделения

Анализ отделения использовали для сравнения относительного отделения опухолевых клеток в присутствии или в отсутствие рекомбинантного OSM (25 нг / мл). Клетки высевали из расчета 10 000 клеток на лунку в 24-луночный планшет и оставляли для прикрепления в течение ночи.После посева клетки помещали в среду RPMI с 1% FBS на 4 часа без обработки. После 4-часовой инкубации клетки затем обрабатывали с OSM или без него в 1% среде в течение отведенного времени (1, 3 или 5 дней). Для оценки отделившихся клеток среду собирали и центрифугировали. Осадки ресуспендировали в равных частях среды RPMI и трипанового синего. Затем подсчитывали отдельные клетки. Клетки, окрашенные трипановым синим, исключались из подсчета. Пролиферацию также измеряли путем трипсинизации адгезивных клеток, осаждения клеток, ресуспендирования гранул в равных частях среды RPMI и трипанового синего и подсчета. Отслоение измеряли путем сравнения количества пролиферирующих клеток и отслоившихся клеток в присутствии или в отсутствие OSM, и рассчитывали отслоение складок. Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения GraphPad Prism для односторонних тестов ANOVA.

Анализ заживления ран

Анализ заживления ран использовали для измерения подвижности клеток рака груди с лечением OSM или без него. MCF-7 luc и MDA-MB-231 luc. Контрольные клетки shCD44 и shNTC высевали по 200000 клеток на лунку в 6-луночный планшет с 10% средой FBS RPMI.Когда клетки становились конфлюэнтными на 80–85%, наносили царапину стерильным наконечником микропипетки p1000. Лунки промывали PBS, а затем 10% среду помещали в каждую лунку с OSM или без него (25 нг / мл). Микрофотографии были сделаны через 72 часа. Площадь каждой царапины измеряли с помощью ImageJ и оценивали складчатую миграцию. Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения GraphPad Prism для односторонних тестов ANOVA.

Химический ингибитор

Ингибитор ММП (GM6001; Santa Cruz Biotechnology) добавляли в среду для роста клеток (10 нМ) за 2 дня до обработки цитокинами в бессывороточной среде; с последующим добавлением всего носителя и OSM еще 2 дня.

Результаты

OSM индуцирует EMT и CD44

⁺ / CD24 ^{— / low} Популяция BCSC

Процесс EMT обычно изучается in vitro с использованием ER + клеток груди человека, потому что по сравнению с ER-клетками они менее агрессивны, фенотипически эпителиальный и реагирует на индукторы метастазов, такие как TGF-β и OSM. ^{64 , 65} Наши исследования показали, что клетки рака молочной железы человека ER + MCF7, обработанные OSM (25 нг / мл), претерпели ЕМТ в течение 3-дневного периода, о чем свидетельствует потеря экспрессии E-кадгерина при измерении. за счет иммунофлуоресценции, а также полной диссоциации отдельных клеток, отделяющихся от исходной колонии и впоследствии приобретающих более веретенообразный мезенхимальный вид (и S1). С другой стороны, клетки ER-MDA-MB-231 росли с мезенхимальным фенотипом и не были способны подвергаться ЭМП, индуцированной OSM. Предыдущие исследования показали, что факторы транскрипции развития, такие как Slug и Snail, ответственны за репрессию белков эпителиальных маркеров, что создает эффект качелей по мере того, как клетки продвигаются через EMT. ⁶⁶ Клетки ER + MCF-7, обработанные OSM (25 нг / мл) в течение одного часа, активировали оба фактора транскрипции Slug и Snail с помощью qRT-PCR (). Обработка OSM (25 нг / мл) клеток MCF-7 также привела к небольшому снижению экспрессии белков клеточной адгезии E-кадгерина и α-катенина с течением времени, как измерено с помощью вестерн-блоттинга ().Эти результаты продемонстрировали, что OSM способен инициировать EMT в клетках рака молочной железы ER + путем активации факторов транскрипции, подавления белков адгезии между клетками и содействия изменению морфологии клеток.

OSM индуцирует EMT и фенотип BCSC в клетках рака груди человека ( A ). Клетки рака груди человека MCF-7 luc обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов. OSM вызывает усиление мезенхимального фенотипа и снижение экспрессии E-кадгерина, что измерено с помощью иммунофлуоресценции с использованием антител к E-кадгерину и актину (увеличение 63 ×).( B ) Клетки MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 1 часа, и qPCR выполняли с праймерами для факторов транскрипции EMT Slug и Snail (* P <0,05, непарные t — контрольная работа). ( C ) Клетки MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 24, 48 и 72 часов, а лизаты клеток оценивали с помощью вестерн-блоттинга на E-кадгерин и α-катенин ( D и E ). Клетки ER + MCF-7 и T47D обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов перед проведением проточной цитометрии.В клетках T47D OSM индуцирует популяцию CD44 ⁺ / CD24 ^— BCSC в 3 раза, в то время как небольшое незначительное увеличение наблюдалось в клетках MCF-7. ** P <0,01, * P <0,05, непарный t -тест.

Другой общей чертой, связанной с прогрессированием опухоли и общим метастатическим бременем, является появление фенотипа стволовых клеток рака молочной железы (BCSC), наблюдаемого как клетки, которые имеют CD44 ⁺ / CD24 ^low в популяции гетерогенных опухолевых клеток.Было показано, что клетки CD44 ⁺ / CD24 ^low обладают чертами онтогенетических стволовых клеток с контролируемым клеточным делением и присутствием в определенном месте. ⁶⁷ Обработка OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов увеличила популяцию CD44 ⁺ / CD24 ^low BCSC в клетках ER + MCF-7 с 1% до более 1,5% (), а в клетках T47D с 1%. % до более 4% (). Популяция клеток CD44 ⁺ / CD24 ^low BCSC в MCF-7 не была значимой из-за высокой базальной экспрессии CD24, наблюдаемой во время анализа FACS.Взятые вместе, OSM индуцирует как EMT, так и CD44 ⁺ / CD24 ^low популяцию BCSC в ER + клетках рака молочной железы, подтверждая предыдущие результаты о том, что OSM является драйвером метастатического потенциала.

OSM индуцирует как экспрессию CD44, так и расщепление

Экспрессия CD44 колеблется во время прогрессирования опухоли и метастазирования. Наши исследования показали, что OSM индуцировал экспрессию CD44 на уровне белка с течением времени в ER +, но не в ER- клетках (). Обработка клеток ER + MCF7 OSM (25 нг / мл) в течение 24, 48 и 72 часов привела к увеличению высокомолекулярных CD44, альтернативно сплайсированных (верхние панели) изоформ и продуктов расщепления с низким молекулярным весом (нижние панели) каждый раз. точки (и), как измерено вестерн-блоттингом лизатов целых клеток с использованием антитела, специфичного к цитоплазматическому фрагменту CD44.Для клеток ER + T47D, OSM-индуцированные высокомолекулярные изоформы CD44 CD44 преобладали через 48 и 72 часа (и). Экспрессия CD44 в более агрессивных клетках ER-MDA-MB-231 показала высокий базальный уровень, который не изменялся в присутствии OSM в течение того же периода времени (и). В этих экспериментах мы наблюдали вызванное OSM увеличение высокомолекулярных полос больше, чем полосы CD44s (70–85 кДа).

OSM индуцирует изоформы CD44 и CD44 (выше 85 кДа) и продукты расщепления (ниже 50 кДа) в ER + клетках, но не ER- клетках ( A ). Опухолевые клетки обрабатывали OSM в течение 24, 48 и 72 часов и лизаты целых клеток собирали с последующим иммуноблоттингом на CD44 с использованием антитела к CD44, любезно предоставленного доктором.Экспрессия Mellor CD44 в MCF-7 (ER +) и ( B ) количественная оценка ( A ). ( C ) экспрессия CD44 в T47D (ER +) и ( D ) количественная оценка ( C ). ( E ) Экспрессия CD44 в MDA-MB-231 (ER-) и ( F ). количественное определение ( E ). Все временные точки лечения OSM сравнивали с соответствующими временными точками без лечения после нормализации до β-актина. Непарные t -теста были выполнены для каждой временной точки.** P <0,01, * P <0,05.

Чтобы подтвердить наш вывод о том, что OSM индуцировал экспрессию CD44 и вариантного белка CD44 в ER + клетках рака молочной железы, мы исследовали уровни мРНК CD44, индуцированные OSM, с помощью qRT-PCR. В то время как незначительное увеличение экспрессии CD44s, вызванной OSM, наблюдалось через 8 часов в клетках MCF-7 (фигура S2A), OSM не вызывал значительного увеличения уровней мРНК отдельных вариантов CD44 (v2 — v10) в момент времени 8 часов. было замечено, что OSM немного увеличивал количество вариантов CD44 (фигура S2B).В совокупности эти исследования показывают, что хотя OSM не индуцирует экспрессию мРНК CD44, это действительно приводит к увеличению уровней CD44 и вариантных белков. Эти результаты показали, что в клетках рака молочной железы ER +, которые имеют более низкий базальный уровень экспрессии CD44, OSM увеличивает экспрессию высокомолекулярных изоформ CD44, в то время как более агрессивные клетки TNBC, которые экспрессируют высокие базальные уровни CD44, не отвечают на OSM. .

Протеолитическое расщепление CD44 матриксными металлопротеиназами (MMP) и γ-секретазой происходит в непосредственной близости от клеточной мембраны и дает низкомолекулярные фрагменты CD44.В частности, CD44 сначала расщепляется MMP-9, а затем подвергается второму расщеплению γ-секретазой с образованием меньшего фрагмента, известного как внутриклеточный домен (ICD) CD44. ⁶⁸ Наша лаборатория ранее показала, что OSM индуцирует активность ММП в клетках опухоли груди. ²¹ Клетки T47D, обработанные глобальным ингибитором ММР GM6001 в течение 48 часов с последующей обработкой OSM (25 нг / мл) в течение 48 часов, снижали количество OSM-индуцированного расщепления CD44 ММП (рис. S3A и B). Протеолитическая активность расщепления ММП дает полосы молекулярной массы 30 кДа и меньше.Подавление OSM-индуцированной активности ММП снижает количество расщепленного CD44. Подводя итог, можно сказать, что OSM способствует EMT в клетках рака молочной железы ER +, увеличивает экспрессию CD44 и индуцирует протеолитическое расщепление CD44, предположительно за счет OSM-индуцированной активности MMP.

OSM-индуцированная EMT не зависит от CD44

Взаимосвязь между OSM-управляемой EMT и OSM-активацией экспрессии CD44 была исследована путем установления стабильных клеток ER + MCF-7 luc и ER-MDA-MB-231 luc с нокдауном экспрессии CD44. с использованием лентивирусной трансдукции shCD44. Клетки MCF-7 luc-shCD44 показали снижение экспрессии CD44s на 70% по данным вестерн-блоттинга по сравнению с контрольными клетками shNTC (не нацеливающий контроль), в то время как клетки MDA-MB-231 luc-shCD44 показали снижение уровня CD44s более чем на 80% ( и ).

Пониженная экспрессия CD44 не отменяет OSM-индуцированную EMT в ER + клетках ( A ). Как MCF-7 luc-shCD44, так и MDA-MB-231 luc-shCD44 клетки демонстрируют нокдаун экспрессии белка CD44 по сравнению с нецелевым контролем ( shNTC) с помощью Вестерн-блоттинга и количественного определения в ( B ).Клетки luc-shNTC и shCD44 MCF7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение одного часа и выполняли анализ qPCR для Slug и Snail. Нокдаун экспрессии CD44 не уменьшал OSM-индуцированный Slug ( C ) или Snail ( D ) в этих клетках (ns = нет значимости, * p <0,05, ** P <0,005, ** * P <0,001, Anova в одну сторону). ( E ) Клетки luc-shNTC и shCD44 MCF7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов, и E-кадгерин наблюдали с помощью иммунофлуоресценции (20-кратное увеличение, шкала шкалы — 20 нм). ( F ) Клетки luc-shNTC и shCD44 MCF7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов для наблюдения морфологии EMT с помощью фазово-контрастных изображений (20-кратное увеличение, масштабная полоса — 100 мкм).

Затем мы исследовали два фактора транскрипции, Slug и Snail, которые, как было показано, управляют EMT, подавляя экспрессию E-кадгерина, что приводит к потере межклеточной адгезии. MCF-7 luc-shCD44 и контрольные клетки shNTC обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 1 часа и проводили qRT-PCR. Как и ожидалось, OSM увеличил Slug и Snail более чем на 1.В 5 раз по сравнению с отсутствием обработки контрольных клеток luc-shNTC MCF-7 (и). Однако обработка OSM клеток luc-shCD44 MCF-7 не привела к значительному изменению экспрессии Slug по сравнению с контрольными клетками shNTC, что позволяет предположить, что CD44 не участвует в повышающей регуляции Slug с помощью OSM (2). Интересно, что нокдаун CD44 приводил к значительному увеличению экспрессии OSM-индуцированной Snail по сравнению с контрольным shNTC в клетках, предполагая, что отсутствие CD44 увеличивает OSM-индуцированную экспрессию Snail ().

OSM-репрессированная экспрессия E-кадгерина во время EMT наблюдалась с помощью иммуноокрашивания конфокальной микроскопии в клетках MCF-7 luc-shCD44 и shNTC ().В присутствии OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов клетки shNTC и shCD44 показали снижение белка межклеточной адгезии, E-кадгерина (). Микрофотографии клеток MCF-7 luc-shCD44 и shNTC, обработанных OSM в течение 72 часов, также были сделаны для наблюдения за фенотипическим процессом EMT (). Хотя обе клеточные линии претерпели характерные процессы EMT, клетки shCD44 MCF-7, по-видимому, образовывали гораздо более плотные колонии до обработки OSM. Вместе эти результаты предполагают, что OSM-индуцированная EMT имеет место независимо от CD44 в клетках ER + MCF-7 luc.

OSM-индуцированное отщепление опухолевых клеток зависит от CD44

Как часть метастатического каскада, опухолевые клетки должны отрываться от своего установленного трехмерного местоположения. Ранее мы показали, что OSM является сильным индуктором отрыва опухолевых клеток, особенно в ER + клетках рака молочной железы. ²¹ MCF-7 luc-shCD44 и MDA-MB-231 luc-shCD44 клетки обрабатывали OSM (25 нг / мл) и измеряли складку в течение 5-дневного периода (). OSM вызывал в 1,8–3 раза увеличение отслоения клеток с использованием менее агрессивных клеток ER + MCF-7 luc-shNTC по сравнению с необработанными клетками (; слева).Когда клетки MCF-7 luc-shCD44 обрабатывались OSM, значительного увеличения отслоения опухолевых клеток не было измерено в дни 1 и 3 (; справа), что позволяет предположить, что нокдаун CD44 устраняет или задерживает способность OSM индуцировать ER + MCF-7. отслойка клеток опухоли молочной железы. Более агрессивные контрольные клетки ER-MDA-MB-231 luc-shNTC не отделялись в присутствии или в отсутствие OSM (; слева). Интересно, что клетки MDA-MB-231 luc-shCD44, обработанные OSM в течение 5 дней, показали 6-кратное увеличение отслоения опухолевых клеток по сравнению с контрольными клетками, таким образом имитируя клетки luc shNTC MCF-7 (; справа).Следовательно, кажется, что клетки MDA-MB-231 luc-shCD44 вернулись из агрессивных и в основном невосприимчивых к OSM клеток к менее агрессивным клеткам, которые реагировали на OSM, когда экспрессия CD44 была снижена. Вместе эти результаты предполагают, что OSM-индуцированное отщепление опухолевых клеток ER + MCF-7 зависит от экспрессии CD44.

Пониженная экспрессия CD44 снижает вызванное OSM отщепление опухолевых клеток в клетках ER + ( A ) Клетки ER + MCF7 luc-shNTC и shCD44 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 5-дневного периода, отслоившиеся клетки считали на дни 1, 3 и 5, и данные представлены как кратное изменение в графическом представлении (* P <0.05, ** P <0,005, *** P <0,001, односторонний Anova). ( B ) Клетки ER-MDA-MB-231 luc-shNTC и shCD44 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 5-дневного периода, отсоединившиеся клетки подсчитывали в дни 1, 3 и 5, а данные представлен как кратное изменение, рассчитанное путем сравнения клеток, не обработанных OSM, с клетками, обработанными OSM, и различий между shNTC, обработанными OSM, и shCD44, как показано в графическом представлении. *** P <0,001, односторонний Anova.

OSM-индуцированная миграция опухолевых клеток зависит от CD44

После EMT опухолевая клетка должна использовать двумерное движение, чтобы инициировать инвазию и метастазирование.Анализы заживления ран проводили с использованием клеток ER + MCF-7 luc-shCD44 и MDA-MB-231 luc-shCD44 для количественной оценки миграции опухолевых клеток. Клетки MCF-7 luc shNTC, обработанные OSM (25 нг / мл) в течение 3 дней, продемонстрировали небольшое 1,5-кратное увеличение миграции по сравнению с необработанными клетками (). Важно отметить, что клетки MCF-7 luc-shCD44 мигрировали в значительно меньшей степени, когда по сравнению с контрольными клетками shNTC в присутствии OSM (, черные полосы). При обработке OSM в течение 3 дней клетки ER-MDA-MB-231 luc-shCD44 показали почти 2.5-кратное снижение количества мигрирующих клеток по сравнению с клетками luc-shNTC MDA-MB-231 (, черные полосы). Это поразительное различие подтверждает важность CD44 в миграции опухолевых клеток для агрессивных ER-клеток рака молочной железы, одновременно демонстрируя роль CD44, индуцированного OSM, в миграции клеток ER + MCF-7. В заключение, индуцированный OSM CD44, по-видимому, важен для отслоения и миграции опухолевых клеток, что необходимо для метастазирования опухолевых клеток.

Пониженная экспрессия CD44 снижает вызванную OSM миграцию опухолевых клеток в ER-клетках больше, чем ER + клетки ( A ) ER + MCF-7 luc-shNTC и shCD44 клетки обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 3 дней, рана заживление было проанализировано с помощью программного обеспечения ImageJ, и данные были интерпретированы как кратное изменение.( B ) Клетки ER-MDA-MB-231 luc-shNTC и shCD44 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 3 дней, заживление ран анализировали с использованием программного обеспечения Image J, и данные интерпретировали как кратное изменение. *** P <0,001, односторонний Anova.

Обсуждение

Метастазирование рака молочной железы требует, чтобы отдельные опухолевые клетки претерпевали множественные изменения и выживали в различных средах, прежде чем достичь вторичного местоположения и разрастаться. Предполагается, что метастатический каскад состоит из ряда специально упорядоченных и рассчитанных по времени событий, которые должны иметь место, начиная с EMT и заканчивая мезенхимально-эпителиальным переходом (MET) и клональной экспансией каждого метастаза.Ранее было показано, что CD44 является важным фактором инвазии и метастатического процесса. В этом исследовании мы показываем, что OSM индуцирует ЕМП, которая не зависит от CD44. Скорее, OSM-индуцированный CD44 необходим для отслоения и миграции клеток опухоли груди, регулируемых OSM.

Наши результаты, представленные здесь, сравниваются с ранее опубликованными данными по OSM-индуцированной EMT, показывая уменьшение эпителиальных маркеров и фенотипические изменения клеток в культуре. ⁶⁹ Мы также продемонстрировали способность OSM увеличивать фенотип BCSC, которая была ранее опубликована. ⁷⁰ OSM-индуцированное отслоение клеток опухоли груди также было опубликовано. ⁷¹ В этом исследовании мы впервые показываем, что OSM индуцирует экспрессию альтернативно сплайсированного и расщепленного белка CD44.

Было показано, что другие цитокины увеличивают метастатические характеристики при раке груди, и здесь мы показали, что OSM увеличивает экспрессию CD44, но не влияет на его альтернативный сплайсинг. Предыдущие исследования показали, что цитокины, такие как TGF-β, являются сильными индукторами CD44. ^{72 , 73} Наши результаты показывают, что OSM индуцирует экспрессию CD44 аналогично экспрессии TGF-β за счет увеличения экспрессии CD44 и последующего расщепления CD44.Хотя ER-клетки не реагировали на OSM так же, как ER +, PR +, HER2- клетки просвета A, было показано, что CD44 действительно экспрессируется на таком высоком базальном уровне, что не наблюдалось увеличения, и, следовательно, TNBC MDA-MB- Клетки 231 luc не использовались для изучения индукции CD44 через OSM, поскольку другие публикации показали то же самое с использованием этой линии ER-клеток. ⁷⁴ Кроме того, OSM-индуцированное расщепление CD44 MMP-9 было уменьшено при использовании неспецифического ингибитора MMP GM6001, как показано уменьшением полос с низкой молекулярной массой. Наша лаборатория и другие ранее показали, что OSM индуцирует экспрессию семейства MMP. ^{75 , 76} Наша лаборатория не смогла показать, что OSM способен индуцировать секретазу, предполагая, что способность OSM расщеплять CD44 ограничена активностью MMP.

Связь между OSM-индуцированной экспрессией ЕМТ и CD44 была исследована с использованием клеточных линий MCF-7 luc и MDA-MB-231 luc shCD44 с подавлением экспрессии CD44. Нецелевые контрольные (shNTC) клеточные линии реагировали аналогично родительским клеткам MCF-7 с точки зрения OSM-индуцированной EMT, транскрипционной активности и белков, связанных с EMT.В клеточных линиях с нокдауном CD44 EMT происходила после обработки OSM, но нокдаун CD44 в luc-клетках MCF-7 демонстрировал меньшее отслоение по сравнению с контрольными клеточными линиями. Клетки MDA-MB-231 luc shCD44 отщеплялись в гораздо большем количестве по сравнению с контролем. Миграция была снижена как в клетках MCF-7 luc, так и в MDA-MB-231 luc shCD44 по сравнению с контрольными клетками shNTC, что предполагает, что CD44 способствует миграции во время метастазирования. Кроме того, с пониженной экспрессией CD44 клетки MCF7 luc росли и реагировали по-разному по сравнению с контрольными клетками с точки зрения морфологических изменений, поскольку они, по-видимому, содержали увеличенное количество округленных популяций клеток, и им также потребовалось гораздо больше времени, чтобы прикрепиться к флаконам с культурой клеток. .Эти данные предполагают потенциальную роль CD44 как молекулы адгезии и белка прикрепления клетки к клетке. Клетки MCF-7 luc-shCD44 также росли в гораздо более плотных колониях, при этом небольшие группы отделялись от первичной колонии после 72 часов обработки OSM. Клетки, которые откололись от первичной колонии после обработки OSM, не подвергались EMT, поскольку они, по-видимому, демонстрировали более прочную межклеточную адгезию. Все это указывает на то, что CD44 не несет прямой ответственности за раннее событие метастазирования, EMT.Хотя предыдущие исследования показали корреляцию между увеличением экспрессии CD44 и EMT, ⁷⁷ здесь мы показываем, что они являются упорядоченными событиями, поскольку CD44 участвует в более поздних метастатических событиях, но не в начальной EMT.

Метастатические явления, такие как клеточная отслойка и миграция, часто считаются шагами, необходимыми на ранней и средней стадиях метастазирования. В присутствии OSM контрольные клетки мигрировали больше, чем клетки shCD44, и аналогичная тенденция наблюдалась для отсоединения.Агрессивные клетки, такие как клетки MDA-MB-231 luc, не отщепляются в присутствии OSM, но нокдаун CD44 способствует отщеплению, вызванному OSM. Противоположное было показано в менее агрессивных luc-клетках MCF-7, где OSM-индуцированное отслоение было снижено в группе shCD44, что позволяет предположить, что CD44 используется менее агрессивными клетками, чтобы стать более метастатическими. Другие показали, что цитокины, такие как TGF-β, увеличивают отслоение и миграцию, но наши данные показывают, что оба события могут происходить через передачу сигналов OSM и экспрессию CD44.

Вместе наши исследования показывают, что связывание OSM с его рецептором приводит к стимулированию EMT, миграции и отслоению в менее агрессивных ER + клетках опухоли молочной железы (). Передача сигналов OSM также приводит к усилению регуляции экспрессии CD44 и расщепления CD44 в этих клетках. OSM-индуцированное расщепление CD44 посредством протеолитического действия MMP способствует миграции и отсоединению менее агрессивных клеток, что делает их более агрессивными. Экспрессия нокдауна CD44 в высокоагрессивных клетках MDA-MB-231 luc позволяет клеткам становиться восприимчивыми к OSM и адаптироваться к последовательности метастатических событий, подобной ER + клеткам.

Передача сигналов OSM индуцирует EMT и активирует CD44 и расщепление CD44 в клетках опухоли груди: после связывания со своим рецептором OSM заставляет клетки подвергаться EMT и последующему отсоединению и миграции. Передача сигналов OSM увеличивает экспрессию трансмембранного белка CD44, а также расщепление посредством MMP. OSM-индуцированный CD44 участвует в миграции и отсоединении, а также в стыковке, что является этапом непосредственно перед экстравазацией во время метастатического каскада.

Заключение

Результаты, представленные в этой рукописи, демонстрируют, что воспалительный цитокин OSM способствует экспрессии CD44 в клетках рака молочной железы ER +. Более того, этот CD44, по-видимому, играет центральную роль в OSM-индуцированном отслоении опухолевых клеток, но не в EMT. Вместе наши результаты предполагают, что регуляция CD44 с помощью OSM важна, по крайней мере, для части метастатического каскада при ER + раке молочной железы. Эти результаты должны быть полезны в будущих исследованиях метастатического рака груди у человека с целью разработки потенциальных терапевтических средств для снижения уровня смертности.

Дополнительные материалы

Рисунок S1

OSM индуцирует EMT в клетках MCF-7.Клетки опухоли молочной железы MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 72 часов. OSM вызывает усиление мезенхимального фенотипа, перераспределение экспрессии E-кадгерина (зеленый цвет, шкала на верхней панели — 20 нм) и небольшое снижение экспрессии α-катенина (зеленый цвет, шкала шкалы на нижней панели — 20 нм), как измерено с помощью иммунофлуоресценция (DAPI = синий).

Рисунок S2

OSM не влияет на различные уровни мРНК варианта CD44 в клетках рака груди ( A ). Клетки MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) для 0.5, 1, 4 и 8 часов с последующим сбором РНК и анализом количественной ПЦР на CD44 (n = 3). ( B ) Клетки MCF-7 обрабатывали OSM (25 нг / мл) в течение 8 часов с последующим сбором РНК и анализом qPCR для различных вариантов сплайсинга CD44. (n = 3).

Фигура S3

OSM-индуцированное расщепление CD44 снижается общим ингибитором MMP в ER + опухолевых клетках груди ( A ). Клетки T47D обрабатывали 10 нМ GM6001 (глобальный ингибитор MMP) в течение 48 часов перед добавлением OSM (25 нг / мл) в течение дополнительных 48 часов.Собирали лизаты целых клеток и проводили вестерн-блоттинг CD44 для наблюдения за продуктами расщепления. OSM индуцирует CD44 в клетках T47D через 48 часов; ингибирование активности ММП снижает индуцированное OSM расщепление CD44. ( B ) Количественное определение полос 15–35 кДа с помощью ImageJ демонстрирует, что GM6001 значительно снижает OSM-индуцированные продукты расщепления CD44 (n = 3) (* P <0,05, непарный t -тест). Изменение кратности рассчитывалось с использованием обработки без OSM в качестве исходного контроля по сравнению с обработкой OSM.GM6001 с кратным изменением OSM рассчитывали путем сравнения его с обработкой OSM в отсутствие GM6001.

Благодарности

Следующие люди внесли свой вклад в эту работу разными способами. Ракель Браун предоставила большое понимание и технический опыт в области иммунофлуоресцентной визуализации. Ханна Скотт предоставила анализ данных и внесла свой вклад в рост и размножение клеток, используемых в этом исследовании. Это исследование частично финансировалось следующими грантами: NIH / NCI R15CA137510, NIH / NCRR P20RR016454, NIH / NIGMS P20GM103408, NIH / NIGMS P20GM109095, Susan G.Фонд Комена {«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «KG100513», «term_id»: «522229661», «term_text»: «KG100513»}} KG100513 и RSG Американского онкологического общества -09-276-01-CSM.

Список сокращений

EMT, переход от эпителия к мезенхиме; CD44, кластер дифференцировки 44; OSM, онкостатин М; BCSC, стволовые клетки рака груди; shRNA, короткая шпильочная РНК.

Согласие на публикацию

Все авторы дали согласие на публикацию.

Заявление о совместном использовании данных

Исходные данные доступны по запросу.

Вклад авторов

Все авторы участвовали в анализе данных, составлении или редактировании статьи, окончательно утвердили версию, которая будет опубликована, и соглашаются нести ответственность за все аспекты работы.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов в этой работе.

Справочные документы

2. Вайгельт Б., Петерс Дж. Л., Ван’т Веер Л. Дж.. Метастазы рака груди: маркеры и модели. Нат Рев Рак . 2005; 5: 591–602.doi: 10.1038 / nrc1670 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Лу X, Кан Ю. Органотропизм метастазов рака груди. J Биологическая неоплазия молочной железы . 2007; 12: 153–162. doi: 10.1007 / s10911-007-9047-3 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Юнг С.Ю., Розенцвейг М., Серейка С.М., Линьков Ф. , Бруфски А., Вайсфельд Дж.Л. Факторы, связанные со смертностью от метастазов рака груди. Контроль причин рака . 2012; 23: 103–112. doi: 10.1007 / s10552-011-9859-8 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5.Шапиро И.М., Ченг А.В., Флитзанис Н.С. и др. Программа альтернативного сплайсинга, управляемая emt, применяется при раке груди человека и модулирует клеточный фенотип. PLoS Genet . 2011; 7. doi: 10.1371 / journal.pgen.1002138 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Крейтон CJ, Чанг JC, Rosen JM. Эпителиально-мезенхимальный переход (EMT) в опухолевых клетках и его клинические последствия при раке груди. J Биологическая неоплазия молочной железы . 2010; 15: 253–260. doi: 10.1007 / s10911-010-9173-1 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7.Yilmaz M, Christofori G. EMT, цитоскелет и инвазия раковых клеток. Метастазы рака Ред. . 2009. 28: 15–33. doi: 10.1007 / s10555-008-9169-0 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Мюллер А., Хомей Б. , Сото Х. и др. Участие хемокиновых рецепторов в метастазировании рака груди. Природа . 2001; 410: 50–56. DOI: 10.1038 / 35065016 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Чаффер CL, Вайнберг RA. Взгляд на метастазирование раковых клеток. Наука (80-) . 2011; 331: 1559–1564.doi: 10.1126 / science.1203543 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Табариес С., Донг З., Аннис М.Г. и др. Клаудин-2 избирательно обогащен и способствует образованию метастазов рака молочной железы в печень за счет вовлечения комплексов интегрина. Онкоген . 2011; 30: 1318–1328. DOI: 10.1038 / onc.2010.518 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Ченг Икс, Хунг МС. Метастазы рака груди в мозг. Метастазы рака Ред. . 2007; 26: 635–643. doi: 10.1007 / s10555-007-9083-x [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15.Чжан Л., Риджуэй Л.Д., Ветцель МДА и др. Идентификация и характеристика ЦКО рака груди, компетентных в отношении метастазов в головной мозг. Научный перевод медицины . 2013; 5: 180ra48. doi: 10.1126 / scitranslmed.3005109 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Канг Ю., Сигел П.М., Шу В. и др. Мультигенная программа, опосредующая метастазирование рака груди в кость. Раковая ячейка. 2003; 3: 537–549. DOI: 10.1016 / S1535-6108 (03) 00132-6 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Сетхи Н, Дай Икс, Зимний К.Г., Кан Ю.Jagged1, полученный из опухоли, способствует остеолитическому метастазированию рака груди в кости, задействуя передачу сигналов notch в костных клетках. Раковая клетка . 2011; 19: 192–205. doi: 10.1016 / j.ccr.2010.12.022 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Санчес-Тилло Э., Лю Й., де Барриос О. и др. Факторы транскрипции, активирующие ЕМТ при раке: помимо ЕМП и опухолевой инвазивности. Cell Mol Life Sci [Интернет] 2012 г. [цитировано 18 октября 2013 г.]; 69: 3429–3456. Доступна с: http: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22945800. По состоянию на 5 июля 2019 г. [PubMed] [Google Scholar] 21. Йорцик CL, Хольцер Р.Г., Райан Р.Э. Онкостатин М вызывает отслоение клеток и увеличивает метастатическую способность клеток карциномы молочной железы человека T-47D. Цитокин . 2006. 33: 323–336. doi: 10.1016 / j.cyto.2006.03.004 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Райан Р.Э., Мартин Б., Меллор Л. и др. Онкостатин М связывается с внеклеточным матриксом в биоактивной конформации: последствия для воспаления и метастазирования. Цитокин .2015; 72: 71–85. doi: 10.1016 / j.cyto.2014.11.007 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Mozaffarian A, Brewer AW, Trueblood ES и др. Механизмы воспаления и фиброза легких, вызванных онкостатином М. Дж Иммунол . 2008. 181: 7243–7253. doi: 10.4049 / jimmunol.181.5.3177 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Лэнгдон C, Керр C, Тонг L, Ричардс CD. Онкостатин М регулирует экспрессию эотаксина в фибробластах и ​​эозинофильное воспаление у мышей C57BL / 6. Дж Иммунол . 2003. 170: 548–555. doi: 10.4049 / jimmunol.170.1.548 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Королева М.М., Райан Р.Э., Хольцер Р.Г., Келлер-Пек К.Р., Джорцик К.Л. Клетки рака груди стимулируют выработку нейтрофилов онкостатина М: потенциальные последствия для прогрессирования опухоли. Рак Res . 2005; 65: 8896–8904. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-04-4557 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Пастушек Дж., Поэтч Дж., Моралес-Прието Д.М., Шлейснер Э., Маркерт У.Р., Георгиев Г. Стимуляция пути JAK / STAT с помощью LIF и OSM в линии клеток гранулезы человека COV434. Дж Репрод Иммунол . 2015; 108: 48–55. DOI: 10.1016 / j.jri.2015.03.002 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Мосли Б., Де IC, Френд Д. и др. Двойные рецепторы Онкостатина М (OSM). Дж. Биол. Хим. . 1996; 271: 32635–32643. doi: 10.1074 / jbc.271.51.32635 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Грант С.Л., Дуглас А.М., Госс Г.А., Бегли К.Г. Онкостатин М и фактор ингибирования лейкемии регулируют рост нормальных эпителиальных клеток молочной железы человека. Факторы роста . 2001; 19: 153–162. DOI: 10.3109/0897719010

83 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Марреро-Диас Р., Браво-Кордеро Дж. Дж., Мегиас Д. и др. Взаимодействие поляризованного MT1-MIVIP-CD44 и расщепление CD44 во время ретракции клеток выявляют важную роль MT1-MMP в CD44-опосредованной инвазии. Цитоскелет клеточного мотила . 2009; 66: 48–61. DOI: 10.1002 / cm.20378 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Стивенс Дж. В., Курригер Г. Л., Картер А. С., Мейнард Дж. А. Экспрессия CD44 в развивающемся и растущем межпозвоночном диске крысы. Dev Dyn .2000; 219: 381–390. DOI: 10.1002 / (ISSN) 1097-0177 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Goebeler M, Kaufmann D, Bröcker EB, Klein CE. Миграция высокоагрессивных клеток меланомы на гиалуроновую кислоту связана с функциональными изменениями, повышенным оборотом и отторжением рецепторов CD44. J Cell Sci [Интернет] 1996; 109 (Pt 7): 1957–1964. Доступна с: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8832418. По состоянию на 5 июля 2019 г. [PubMed] [Google Scholar] 34. Дасгупта А., Такахаши К., Катлер М., Танабе К.О-связанное гликозилирование изменяет адгезию CD44 к гиалуронату в клетках карциномы толстой кишки. Biochem Biophys Res Commun . 1996. 227: 110–117. doi: 10.1006 / bbrc.1996.1475 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Скелтон Т.П., Зенг С., Нокс А., Стаменкович I. Гликозилирование оказывает как стимулирующее, так и ингибирующее действие на клеточную поверхность и связывание растворимого CD44 с гиалуронаном. Дж. Ячейка Биол . 1998. 140: 431–446. doi: 10.1083 / jcb.140.2.431 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37.Wu RL, Sedlmeier G, Kyjacova L, et al. Взаимодействия гиалуроновой кислоты с CD44 способствуют зависимой от BMP4 / 7 экспрессии Id1 / 3 в клетках меланомы. Научный сотрудник . 2018; 8: 1–12. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 38. Zoller M, Herrlich P, Giinthert U, Herrlich P. Варианты сплайсинга CD44 вызывают метастатическое поведение у крыс: гомологичные последовательности экспрессируются в линиях опухолевых клеток человека. Рак Res . 1991; 51: 5292–5297. [PubMed] [Google Scholar] 39. Родригес К., Монже Дж., Руане П., Дютрийо Б., Лефрансуа Д., Тейе К.Паттерны экспрессии CD44 в опухолях молочной железы и толстой кишки: исследование вариантов сплайсинга на основе ПЦР. Инт Дж. Рак . 1995; 64: 347–354. DOI: 10.1002 / (ISSN) 1097-0215 ​​[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Xie J-W, Chen P-C, Zheng C-H и др. Оценка прогностической ценности и функциональной роли CD44v6 при раке желудка. J Cancer Res Clin Oncol . 2015; 141: 1809–1817. DOI: 10.1007 / s00432-015-1964-8 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Van Hal NLW, Van Dongen GAMS, Ten Brink CBM и др.Оценка растворимого CD44v6 как потенциального сывороточного маркера плоскоклеточного рака головы и шеи. Clin Cancer Res . 1999; 5: 3534–3541. [PubMed] [Google Scholar] 42. Williams K, Motiani K, Giridhar PV, Kasper S. CD44 интегрирует передачу сигналов в нормальных стволовых клетках, раковых стволовых клетках и (пре) метастатических нишах. Exp Biol Med (Maywood) . 2013; 238: 324–338. DOI: 10.1177 / 1535370213480714 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43. Окамото И., Кавано Ю., Мураками Д. и др. Протеолитическое высвобождение внутриклеточного домена CD44 и его роль в сигнальном пути CD44. Дж. Ячейка Биол . 2001; 155: 755–762. doi: 10.1083 / jcb.200108159 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Mckallip RJ, Do Y, Fisher MT, Robertson JL, Nagarkatti PS, Nagarkatti M. Роль CD44 в вызванной активацией гибели клеток: мыши с дефицитом CD44 демонстрируют усиленный Т-клеточный ответ на обычные и суперантигены. Инт Иммунол . 2002; 14: 1015–1026. DOI: 10.1093 / intimm / dxf068 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Иида Дж., Клэнси Р., Дорчак Дж. И др. ДНК-аптамеры против экзона v10 CD44 ингибируют миграцию клеток рака груди. PLoS One . 2014; 9. doi: 10.1371 / journal.pone.0088712 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Наор Д., Сионов Р.В., Иш-Шалом Д. CD44: структура, функция и связь со злокачественным процессом. Adv Cancer Res . 1997. 71: 241–319. [PubMed] [Google Scholar] 47. Ю Кью, Тул Б.П. Новый альтернативно сплайсированный экзон между v9 и v10 обеспечивает молекулярную основу для синтеза растворимого CD44. Дж. Биол. Хим. . 1996; 271: 20603–20607. DOI: 10.1074 / jbc.271.34.20603 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Ридир Дж. А., Готли, округ Колумбия, Уолш, Мэриленд, Фосетт Дж., Antalis TM. Экспрессия антисмыслового варианта 6 CD44 ингибирует метастазирование колоректальной опухоли и рост опухоли в раневой среде. Рак Res . 1998. 58: 3719–3726. [PubMed] [Google Scholar] 49. Тодаро М., Гаггианези М., Каталано В. и др. CD44v6 является маркером конститутивных и перепрограммированных стволовых клеток рака, вызывающих метастазирование рака толстой кишки. Стволовая клетка . 2014; 14: 342–356. DOI: 10.1016 / j.stem.2014.01.009 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Хао Дж., Чен Х., Мэдиган М. С. и др. Совместная экспрессия транспортеров CD147 (EMMPRIN), CD44v3-10, MDR1 и монокарбоксилата связана с лекарственной устойчивостью и прогрессированием рака простаты. Бр. Дж. Рак . 2010; 103: 1008–1018. doi: 10.1038 / sj.bjc.6605822 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Хирага Т., Накамура Х. Сопоставимые роли CD44V8-10 и CD44S в развитии метастазов в кости на мышиной модели. Онкол Летт .2016; 12: 2962–2969. doi: 10.3892 / ol.2016.4985 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Iida N, Bourguignon LY. Новые варианты сплайсинга CD44, связанные с раком груди человека. Дж. Cell Physiol . 1995. 162: 127–133. DOI: 10.1002 / jcp.1041620115 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Машита Н., Ямада С., Накаяма Г. и др. Переход от эпителия к мезенхиме может быть вызван переключением изоформы CD44 при колоректальном раке. J Surg Oncol . 2014; 110: 745–751. DOI: 10.1002 / jso.23705 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Shang Z, Cai Q, Zhang M, et al. Переход от клетки CD44 ⁺ к клетке ЕМТ вызывает метастазирование рака простаты. Онкотоваргет . 2015; 6: 1202–1216. doi: 10.18632 / oncotarget.2841 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Чо Ш., Пак И. С., Ким Х. Дж. И др. CD44 усиливает эпителиально-мезенхимальный переход в связи с инвазией рака толстой кишки. Инт Дж. Онкол . 2012; 41: 211–218. [PubMed] [Google Scholar] 57.Браун Р.Л., Рейнке Л.М., Дамеров М.С. и др. Переключение изоформ сплайсинга CD44 в эпителии человека и мыши важно для эпителиально-мезенхимального перехода и прогрессирования рака груди. Дж. Клин Инвест . 2011; 121: 1064–1074. doi: 10.1172 / JCI57873 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58. Ориан-Руссо В. CD44, терапевтическая мишень для метастазирующих опухолей. евро J Рак . 2010; 46: 1271–1277. DOI: 10.1016 / j.ejca.2010.02.024 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59.Валент П., Боннет Д. , Де Мария Р. и др. Определения и терминология стволовых клеток рака: дьявол кроется в деталях. Нат Рев Рак . 2012; 12: 767–775. doi: 10.1038 / nrc3368 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. Рикардо С., Виейра А.Ф., Герхард Р. и др. Маркеры стволовых клеток рака молочной железы CD44, CD24 и ALDh2: распределение экспрессии в пределах внутреннего молекулярного подтипа. Дж. Клин Патол . 2011; 64: 937–946. DOI: 10.1136 / jcp.2011.0 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. Хольцер Р.Г., Райан Р.Э., Томмак М., Шлекуэй Э., Джорцик К.Л.Онкостатин М стимулирует отделение резервуара инвазивных клеток карциномы молочной железы: роль циклооксигеназы-2. Clin Exp Метастаз . 2004. 21: 167–176. DOI: 10.1023 / B: CLIN.0000024760.02667.db [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 62. Болин С., Тавара К., Сазерленд С. и др. Онкостатин М способствует метастазированию опухоли молочной железы в кости и остеолитической деградации кости. Гены рака . 2012; 3: 117–130. doi: 10. 1177 / 19476018284 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 63.Ливак К.Дж., Шмитген Т.Д. Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2-ΔΔCT. Методы . 2001; 25: 402–408. DOI: 10.1006 / meth.2001.1262 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 65. Поллак В., Саркози Р., Банки З. и др. Эффекты онкостатина М на ЕМП в клетках проксимальных канальцев человека: дифференциальная роль передачи сигналов ERK. Am J Physiol Renal Physiol . 2007; 293: F1714–26. DOI: 10.1152 / ajprenal.00130.2007 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 66.Эллул С., Элстранд М.Б., Несланд Дж. М. и др. Улитка, слизень и smad-взаимодействующий белок 1 как новые параметры агрессивности заболевания при метастатической карциноме яичников и молочной железы. Рак . 2005; 103: 1631–1643. DOI: 10.1002 / cncr.21069 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 67. Гиатроманолаки А., Сивридис Э., Фиска А., Кукуракис М.И. Фенотип CD44 + / CD24- связан с «тройным отрицательным» состоянием и неблагоприятным прогнозом у пациентов с раком груди. Мед Онкол . 2011; 28: 745–752. DOI: 10.1007 / s12032-010-9530-3 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 68.Mellor L, Knudson CB, Hida D, Askew EB, Knudson W. Фрагмент внутриклеточного домена CD44 изменяет функцию CD44 в хондроцитах. Дж. Биол. Хим. . 2013; 288: 25838–25850. doi: 10.1074 / jbc.M113.494872 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 69. Джанк-диджей, Брайсон Б.Л., Джексон М.В. HiJAK’d сигнализация; парадокс STAT3 в старении и прогрессировании рака. Раки (Базель) . 2014; 6: 741–755. doi: 10.3390 / Cancers6020741 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 70.Yu Q, Stamenkovic I. Локализованная на клеточной поверхности матриксная металлопротеиназа-9 протеолитически активирует TGF-B и способствует инвазии опухоли и ангиогенезу. Genes Dev . 2000. 14: 163–176. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 72. Ван Л., Чжан Д., Чжан С. и др. Сигнатура экспрессии микроРНК, характеризующая свойства опухолевых клеток при раке груди. Онкол Летт . 2012; 3: 119–124. doi: 10.3892 / ol.2011.444 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 73.Нагата Т., Кай Х., Шибата Р., Кога М., Йошимура А., Имаидзуми Т. Онкостатин М, цитокин семейства интерлейкинов-6, активирует матричную металлопротеиназу-9 посредством митоген-активируемой протеинкиназы киназа-регулируемый внеклеточным сигналом киназный путь в культивируемых гладкомышечные клетки. Артериосклер тромб Vasc Biol . 2003. 23: 588–593. doi: 10.1161 / 01.ATV.0000071350.78872.C4 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 74. Lilja A, Nordborg C, Brun A, Salford LG, Aman P. Экспрессия цитокинов семейства IL-6 в опухолях головного мозга человека. Инт Дж. Онкол . 2001; 19: 495–499. [PubMed] [Google Scholar] 75. Xu H, Tian Y, Yuan X и др. Роль CD44 в эпителиально-мезенхимальном переходе и развитии рака. Онко Таргетирует . 2015; 8: 3783–3792. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 76. Ли Дж., Чжоу Б.П. Активация путей β-catenin и Akt с помощью Twist имеет решающее значение для поддержания свойств, подобных стволовым клеткам, ассоциированным с EMT. BMC Рак . 2011; 11:49. doi: 10.1186 / 1471-2407-11-49 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 77.Gao J, Zhu Y, Nilsson M, Sundfeldt K. Изоформы TGF-β индуцируют независимую от EMT миграцию клеток рака яичников. Cancer Cell Int . 2014; 14: 72. doi: 10.1186 / 1475-2867-14-67 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Январь — 2019 — OSM!

Нью-Йорк Художественная сцена: два кебуанских художника открывают выставку «Рыбаки мужчин»

Ванетт Кольменарес, Нью-Йорк — Погода здесь была ужасно морозной, но внутри Филиппинского центра атмосфера была теплой, веселой и веселой во время открытия выставки «Ловцы людей» двух известных Себуано: Джун Альфонсо и Гиль Манинго.Два художника были приятелями по колледжу Университета […]

.

Национальная безопасность исключает Филиппины из программ для неиммиграционных рабочих

Из-за большого количества случаев задержания и торговли людьми Маривир Р. Монтебон, Нью-Йорк — Начиная с этого года, филиппинцам может быть запрещено работать в США в качестве временных гастарбайтеров с диагнозом H. -2A и H-2B, после того, как Министерство внутренней безопасности обратило внимание на высокие случаи человеческих […]

Сугбусог: праздник синулогов

КУХОННЫЕ ИСТОРИИ Айссы Дела Крус Празднование праздника Сто.Ниньо был частью моей жизни с тех пор, как я была маленькой девочкой. Я вырос в Тондо, Манила, где каждое 3-е воскресенье января отмечается такой же праздник, как и в Себу. Помимо религиозных обрядов, мои воспоминания и воспоминания […]

Студенты Новой школы документально подтверждают кризис беженцев на Лесбосе

Спектакль Мелиссы Дела Крус для New School International Affairs New York — Выпускники Новой школы отправились в поездку на Лесбос, чтобы придать беженке человеческое лицо и голос кризис в Европе.На основе достоверных интервью рассказы беженцев должны дать реальную картину для […]

Всемирно известная лавовая прогулка Катрионы Грей в Нью-Йорке, запечатленная Бойетом Ловеритой

Нью-Йорк — Мисс Вселенная 2018 Катриона Грей из Филиппин наиболее известна своей «лавовой прогулкой», связанной с лавой, извергающейся из активных стратовулкан Гора Майон в Албайе, считающийся идеальным конусом в мире из-за своей симметричной конической формы. Супермодель Тайра Бэнкс немедленно одобрила […]

Кота.

Искусство с сердцем: Нью-Йоркские художники чтят Манинга Родригеса, поддерживают раковых воинов

Автор: Маривир Р.Монтебон, Нью-Йорк — Искусство ценится в начале 2019 года с открытия выставки Hand to Hand Art, представленной Фондом филиппинских художников, Inc. На ней представлены работы Мануэля Родригеса-старшего, светила искусства и отца Филиппин. эстампа и его сына художника, покойного […]

Оглянитесь назад: Top OSM! Истории в 2018 году

Политические комментарии и общественное мнение занимают первое место среди читателей Fil-Ams, за ними следует (обычно) большая любовь к развлечениям.Маривир Р. Монтебон Нью-Йорк — В 2018 году читатели сообщества Fil-Am резко заинтересовались местными проблемами и политикой Филиппин. Фактически, читательская аудитория нашего освещения администрации Дутерте и […]

2018: год настойчивости и многих первых

Маривир Р. Монтебон Президент, FAPCNY 2018 год начался с упорства и закончился благодарностью и надеждой. Оглядываясь назад, можно сказать, что год собаки по китайскому календарю прошел как явно опасный, но, тем не менее, журналисты встретили его с упорством и солидарностью.Первое сражение, проведенное FAPCNY […]

Использование базовых карт OpenStreetMap с QGIS 3.0

QGIS 3 — это новая волна ГИС с открытым исходным кодом. Он не только чрезвычайно быстрый и эффективный, позволяя использовать почти все типы геопространственных данных, которые вы можете использовать, но он также включает в себя средство 3D-рендеринга и способы экспорта ваших творений прямо в Интернет. И давайте не будем забывать об ОГРОМНОМ количестве инструментов, которые поставляются с ним из коробки.

Но он вышел всего пару дней, и в нем отсутствуют старые добрые «Инструменты быстрой карты», к которым мы все привыкли, что позволяет нам легко добавлять OpenStreetMap, Stamen и другие фоновые карты.Возможно, вы читали, что вы можете включить их, используя плитки xyz, но, если вы похожи на меня, это может также сказать: «Воткните сыр в клавиатуру и немного покрутите». Как средний пользователь ГИС, я понятия не имею, что такое сервер листов xyz, и, если он вам не понадобится, вы, вероятно, тоже не узнаете. Итак, хорошие новости: я собрал небольшой блог, чтобы вы могли с легкостью вернуть свои услуги.

Вот как это сделать:
1 — Перейдите на https://wiki.openstreetmap.org/wiki/Tile_servers

Откройте вики OSM
2 — вы увидите столбец «url плитки.Это веб-адреса плиток xyz, которые нужны вам для работы.

адреса плитки xyz
3 — Откройте QGIS (3.0) и убедитесь, что окно вашего браузера открыто. Вы увидите вариант плитки xyz примерно на три четверти вниз по списку.

вариант плитки xyz

4 — Выберите вариант «новое соединение», и, как вы уже догадались, мы собираемся использовать информацию с веб-страницы и поместить ее в соответствующие поля.ОДНО ВАЖНОЕ ПРИМЕЧАНИЕ. Убедитесь, что вы удалили символы «$», прежде чем копировать и вставлять их.

5 — Нажмите «ОК», и вперед!

Вуаля!

Теперь, когда вы знаете, как это сделать, вы можете просмотреть список и добавить остальные службы.

Слой	xyz веб-URL
Стандартный тайловый слой OpenStreetMap	https: // а.tile.openstreetmap.org/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ https://b.tile.openstreetmap.org/${z}/${x}/${y}. png ИЛИ https://c.tile.openstreetmap.org/${z}/${x}/${y}.png
Карты Викимедиа	https://maps.wikimedia.org/osm-intl/${z}/${x}/${y}.png
OpenCycleMap	http://a.tile.opencyclemap.org/cycle/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tile.opencyclemap.org/cycle/${z} /${x}/${y}.png
Стиль гуманитарной карты	http: // а.tile.openstreetmap.fr/hot/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tile.openstreetmap.fr/hot/${z}/${x}/$ {y} .png
OSM Франция	http://a.tile.openstreetmap.fr/osmfr/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tile.openstreetmap.fr/osmfr/${z} /${x}/${y}.png ИЛИ http://c.tile.openstreetmap.fr/osmfr/${z}/${x}/${y}.png
OpenSkiMap	http://tiles. skimap.org/openskimap/${z}/${x}/${y}.png
OpenSeaMap	http: // tile.openseamap.org/seamark/${z}/${x}/${y}.png
пути с метками	https://tile.waymarkedtrails.org/hiking/${z}/${x}/${y}.png
Веломаршруты	https://tile.waymarkedtrails.org/cycling/${z}/${x}/${y}.png
Походы и велосипеды	http://toolserver.org/tiles/hikebike/${z}/${x}/${y}.png
Отмывка	http://c.tiles.wmflabs.org/hillshading/${z}/${x}/${y}.png
OSM B&W	https: // tile.wmflabs.org/bw-mapnik/${z}/${x}/${y}.png или https://a.tiles.wmflabs.org/bw-mapnik/${z}/${x}. /${y}.png ИЛИ https://b.tiles.wmflabs.org/bw-mapnik/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ https://c.tiles.wmflabs .org / bw-mapnik / $ {z} / $ {x} / $ {y} .png
OSM без этикеток	https://tiles.wmflabs.org/osm-no-labels/${z}/${x}/${y}.png или https://a.tiles.wmflabs. org/osm-no- label / $ {z} / $ {x} / $ {y} .png ИЛИ https://b.tiles.wmflabs.org/osm-no-labels/${z}/${x}/${y } .png ИЛИ https://c.tiles.wmflabs.org/osm-no-labels/${z}/${x}/${y}.png
Тонер для тычинок	http://a.tile.stamen.com/toner/${z}/${x}/${y}.png
Тычиночная акварель	http://c.tile.stamen.com/watercolor/${z}/${x}/${y}.jpg
Транспортная карта	http://a.tile2.opencyclemap.org/transport/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tile2.opencyclemap.org/transport/${z} /${x}/${y}.png
Грозовой лес Пейзаж	http://a.tile.thunderforest.com/landscape/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tile.thunderforest.com/landscape/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://c.tile.thunderforest.com/landscape/${z } / $ {x} / $ {y} .png
Грозовой лес на открытом воздухе	http://a.tile.thunderforest.com/outdoors/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tile.thunderforest.com/outdoors/${z} /${x}/${y}. png ИЛИ http://c.tile.thunderforest.com/outdoors/${z}/${x}/${y}.png
пнвкарте	http://toolserver.org/~cmarqu/hill/${z}/${x}/${y}.png
OpenPtMap	http: // www.openptmap.org/tiles/${z}/${x}/${y}.png
CartoÿLight («Позитрон»)	https: // cartodb-basemaps- {s} .global.ssl.fastly.net / light_all / {z} / {x} / {y} .png
CartoÿDark («Темная материя»)	https: // cartodb-basemaps- {s} .global.ssl.fastly.net / dark_all / {z} / {x} / {y} .png
OpenRailwayMap	http://a.tiles.openrailwaymap.org/standard/${z}/${x}/${y}.png ИЛИ http://b.tiles.openrailwaymap.org/standard/${z} / $ {x} / $ {y}.png ИЛИ http://c.tiles.openrailwaymap.org/standard/${z}/${x}/${y}.png

Вот список, который вы можете скопировать и вставить напрямую 🙂

Драконы8mycat

Совещание по наукам об океане 2020

Наиноа Томпсон

Воскресенье, 16 февраля 2020 г.
17:00 — 18:00
Расположение: Конференц-центр Сан-Диего, 6A-F, UL

Наиноа Томпсон — первый гавайец за 600 лет, практикующий древнее полинезийское искусство мореплавания: дальние плавания по открытому океану на традиционном каноэ с двойным корпусом без помощи современных инструментов.Его работа привела к новому пониманию и возрождению традиционных искусств плавания, утерянных веками из-за исчезновения таких методов путешествий, а также колонизации и вестернизации полинезийских архипелагов. Как президент Polynesian Voyaging Society (PVS), некоммерческой исследовательской и образовательной организации, Томпсон недавно совершил четырехлетнее кругосветное путешествие на Hōkūleʻa, традиционном двухкорпусном каноэ. В ходе этих путешествий Томпсон и его команда познакомились с тысячами людей, в том числе с мировыми лидерами, чтобы подчеркнуть важность ресурсов океана, культурного наследия и защиты этих важнейших мест в будущем.Прочтите полную биографию Наиноа Томпсон.

Хайди Сосик и Эрик ван Себилль

Вторник, 18 февраля 2020 года
Время: 10:30 — 12:30
Расположение: Конференц-центр Сан-Диего, 6A-F, UL

Хайди Сосик — старший научный сотрудник Океанографического института Вудс-Хоул (WHOI) и в настоящее время возглавляет кафедру Стэнли Уотсона за выдающиеся достижения в океанографии. Биолог-океанограф и изобретатель, Сосик и ее сотрудники разработали автоматизированные подводные анализаторы, которые значительно расширяют возможности ученых и менеджеров ресурсов по изучению микроскопических организмов, питающих пищевые цепи океана, взаимодействующих с климатом Земли и иногда вызывающих опасное цветение водорослей. экосистема и здоровье человека.Посмотреть полную биографию Хайди Сосик.

Эрик ван Себилль — физический океанограф в Утрехтском университете. Он изучает пути и временные рамки, по которым океанские течения переносят воду, питательные вещества, планктонные организмы и загрязнения, такие как пластик. Ван Себилль возглавляет финансируемый Европейским исследовательским советом проект «Отслеживание пластика в наших морях» (TOPIOS), цель которого — создать трехмерную карту морского загрязнения пластиком и отследить его до источников. Он страстно увлечен научным общением, провел более 300 интервью о загрязнении пластиком и консультировал парламент Великобритании и Европейскую комиссию по масштабам проблемы.Недавно он был назван медалистом Джеймса Б. Маселвейна 2019 года. Посмотреть полную биографию Эрика ван Себилля.

Пленарное заседание по присуждению награды Заседанию по наукам об океане 2020

Среда, 19 февраля 2020 г.
10:30 — 12:30
Расположение: Конференц-центр Сан-Диего, 6A-F, UL

Презентации AGU Sverdrup Lecture , TOS Award Lecture и ASLO A.C. Redfield Lifetime Achievement и Raymond L. Lindeman Awards .

ASLO Раймонд Л.Лекция премии Линдемана

Cristina Romera-Castillo
Instituto de Ciencias del Mar-CSIC
Впервые эта награда была вручена в 1987 году за выдающуюся работу, написанную молодым ученым-водником. Документ, за который вспоминают Раймонда Л. Линдемана, опубликованный посмертно в 1942 году, с тех пор стал основой для исследований потока энергии в сообществах растений и животных.

Лекция ASLO A.C. Redfield Lifetime Achievement Award

Сибил Зейтцингер
Университет Виктории
Премия за выслугу лет была впервые вручена в 1994 году для признания и награждения крупных, долгосрочных достижений в области лимнологии и океанографии, включая исследования, образование и служение обществу и обществу.Особое внимание при отборе уделяется признанным ученым-водникам, чья работа признана за ее важность и долгосрочное влияние.

Лекция AGU Sverdrup Award

Мэри-Луиза Тиммерманс
Йельский университет
Лекция Харальда Ульрика Свердрупа посвящена жизни и деятельности геофизика Харальда Свердрупа. Лектор Свердрупа выбран за то, чтобы продемонстрировать работу Свердрупа с выдающимся вкладом в фундаментальную науку об атмосфере и океанах и / или бескорыстное служение, способствующее сотрудничеству в области атмосферных и океанографических исследований.

Маргарет Лейнен

21 февраля 2020 г., пятница
16:00 — 5:00 вечера.
Расположение: Конференц-центр Сан-Диего, 6A-F, UL

Маргарет Лейнен , бывший президент AGU, вице-канцлер Калифорнийского университета в Сан-Диего по морским наукам, директор океанографического института Скриппса и декан Школы морских наук.

Лейнен — ​​отмеченный наградами океанолог и опытный руководитель с обширным национальным и международным опытом в области наук об океане, глобального климата и окружающей среды, федерального управления исследованиями и некоммерческих стартапов.Она является исследователем в области палеоокеанографии и палеоклиматологии. Ее работа сосредоточена на океанических отложениях и их связи с глобальными биогеохимическими циклами, а также на истории океана и климата Земли. Лейнен возглавляет исследовательские и образовательные программы Калифорнийского университета в Сан-Диего в области наук об океане, Земле и атмосфере в Scripps Oceanography, ведущем исследовательском институте окружающей среды, который занимается наиболее насущными экологическими проблемами, с которыми сталкивается наша планета, предоставляет знания, необходимые для решения этих проблем, и обучает следующее поколение лидеров науки.

До прихода в Скриппс она работала проректором по морским и экологическим инициативам и исполнительным директором океанографического института Харбор-Бранч, подразделения Атлантического университета Флориды. До этого она семь лет проработала в Национальном научном фонде (NSF) в качестве помощника директора по наукам о Земле и координатора экологических исследований и образования. Находясь в NSF, она руководила и напрямую влияла на некоторые из наиболее значимых программ в области морских, атмосферных и земных наук.Недавно она работала послом Государственного департамента США по вопросам океана и была лауреатом премии AGU Ambassador Award 2019.

Получение собственных бронирований на OpenStreetMap: стенограмма | автор: Алан МакКончи

Хорошо, возвращаясь к OpenStreetMap, вот где мы находимся: люди уже добавляют эти оговорки в OpenStreetMap, теперь мы официально получили эти теги, признанные сообществом, и теперь мы готовы, наконец, получить их на карте. Мы можем обратиться к разработчикам стандартного стиля карты OpenStreetMap и попросить их добавить эти элементы на карту.

В OSM стиль базовой карты, который они используют, на самом деле не пытается изобрести что-то новое. Насколько это возможно, мы стараемся использовать уже широко используемые картографические условные обозначения. Вот несколько фотографий Пола Нормана, который начал просматривать кучу имеющихся у него печатных атласов, чтобы увидеть, как бронирования уже отображаются на картах. Они почти всегда отображались коричневым цветом и имели разный стиль в зависимости от того, мелкомасштабная это карта или крупномасштабная.

Это потому, что резервирование — сложная вещь: когда вы уменьшаете масштаб, вы обычно хотите, чтобы они отображались в виде большого цветового поля на ландшафте. Но когда вы увеличиваете масштаб, вы не хотите, чтобы это цветовое поле было отвлекающим и отвлекающим, когда вы смотрите на более мелкие объекты, такие как дороги и здания. Вы просто хотите указать границы в этой точке, заливка вам не нужна. Поэтому мы попытались воспроизвести это в OpenStreetMap.

На самом деле это было довольно просто, мы могли просто скопировать множество стилей, которые уже использовались для заповедников и парков, но не забудьте дать им свой цвет и свой собственный адаптированный стиль, чтобы было совершенно ясно, что это не заповедники.

https://www.openstreetmap.org/relation/6750258

Если вы хотите делать какую-либо совместную картографию с OSM, вам нужно немного познакомиться с github, который является хранилищем кода, в котором живет стиль. Идите вперед и погрузитесь в дело. Чтобы вносить изменения и сотрудничать, вам необходимо загрузить собственный отрывок из части мира OSM. Вся база данных для всей планеты слишком велика, чтобы работать с ней. Я начал просто с загрузки штата Вашингтон. После этого нужно немного научиться этому стилю работать; есть программное обеспечение под названием Docker, которое вы можете загрузить на свой компьютер, и оно сделает большую часть работы за вас. Он делает полную копию всего программного обеспечения, необходимого для запуска инфраструктуры рендеринга для OpenStreetMap. Затем вы можете просто попробовать изменить одну строку кода и посмотреть, что произойдет.

https://github.com/gravitystorm/openstreetmap-carto/

Мы используем CartoCSS, который похож на таблицы стилей CSS для Интернета, но специально для картографии. Сообщения о смерти CartoCSS сильно преувеличены. Он все еще используется. Вот фрагмент кода, который делает возможным создание этих охраняемых территорий.

http: // github.com / gravitystorm / openstreetmap-carto / pull / 3521

После того, как мы внесем это изменение и протестируем его на нашем компьютере, и мы подумаем, что он выглядит хорошо, мы создаем «запрос на вытягивание» со словами: «Вот строки, которые я хочу изменить, это нормально? » и другие участники стиля карты рассмотрят его, протестируют и решат, безопасно ли переходить в основную ветвь репозитория кода.

http://github.com/gravitystorm/openstreetmap-carto/pull/3521

И пока вы делаете все эти шаги, есть много других участников стиля OSM, которые очень полезны, но они ничего за вас не сделают. .Они могут прокомментировать предлагаемое изменение, и это может быть изменение одной строки, которое они могут легко исправить для вас, но они скажут: «Не могли бы вы изменить это и отправить повторно»? И это здорово, это еще и хороший опыт обучения. Они очень полезны, чтобы ответить на любые вопросы, но вы должны продвигать свой пул-реквест самостоятельно.

Но, конечно, в процессе проверки нашего предложения мы понимаем, что да, уже были зоопарки, которые использовали тот же цвет, который мы хотели использовать для местных резерваций.Мы поняли, что собираемся сделать именно то, что нам сказали не делать. Поэтому мы приостановили запрос на включение на некоторое время, и, к счастью, в других частях стиля велась другая работа по изменению некоторых других цветов. Они уже работали над объединением цветов для зоопарков и тематических парков, и они изменили их на фиолетовый, освободив коричневый цвет, который мы хотели для местных резерваций. Таким образом, когда вы коллективно работаете над стилем, когда многие люди работают над разными его частями одновременно, возникает множество трогательных моментов.

http://github.com/gravitystorm/openstreetmap-carto/pull/3582

Итак, мы утвердили запрос на перенос, и теперь на карте отображаются бронирования! Вот Lummi Nation в моем районе.

Вот некоторые из них по обе стороны границы между Монтаной и Альбертой.

Вот некоторые из них на Амазонке в Бразилии, где они неправильно использовали бирки заповедников и отображали их зеленым цветом. Теперь мы можем отображать правильные метки и раскрашивать их по-разному, чтобы вы могли видеть, какие территории являются коренными заповедниками, а какие — биосферными.

А теперь мы должны раскрыть, почему составление карты местных резерваций — это небольшая проблема, и почему многие картографы предпочли бы избежать этой проблемы и игнорировать их. И, наверное, поэтому мы раньше не наносили эти запасы на карту. Вот резервация Пуйаллап, которая находится прямо напротив гавани и включает большую часть порта.

https://www.openstreetmap.org/relation/3854097

Те из вас, кто живет здесь, могут быть удивлены масштабом этой резервации. По большей части это пригород. Большая часть земли в этой резервации была куплена иностранцами за последние 150 лет, и сейчас она почти не заметна как резервация на земле, и лишь несколько знаков, показывающих, когда вы входите в нее или покидаете ее. Процитирую: «Резервация Пуйаллап достаточно велика, чтобы ее можно было затенять, но обычно ее не используют на картах». Итак, вы увидите множество карт штата Вашингтон, на которых нанесены все остальные резервации, но здесь они такие: «Ага, это слишком сложно, слишком запутанно в городской зоне» и поэтому они проигнорируют это.Итак, теперь OpenStreetMap показывает, что эта оговорка существует, это реальная вещь, она действительно имеет смысл, это реальный договор, который мы должны соблюдать.

https://washingtonlandscape.blogspot.com/2016/02/puyallup-reservation-map.html

«Подавляющее большинство резервации Пуйаллап принадлежит не индейцам. Скупка резервации произошла в конце 1800-х годов, когда резервация была передана на участки отдельным членам племени. Затем эти участники потеряли свою землю из-за серии незаконных договоров аренды, которые были преобразованы в продажу с одобрения штата Вашингтон с вводящими в заблуждение отчетами в США.S Конгресс. Тем не менее, границы резервации остались неизменными и по-прежнему признаны, и они определяют и продолжают определять политику и землепользование в очень сильно урбанизированной среде ». — Дэн МакШейн, «Читая Вашингтонский пейзаж»

https://www.openstreetmap.org/relation/7414790

В некоторых областях все становится еще сложнее. Это резервация Агуа Калиенте в Палм-Спрингс, Калифорния. Его также нет на многих печатных картах. И вы можете видеть, что это одна из этих лоскутных площадок, когда правительство США отдавало землю железным дорогам, и в этом случае они вернули (вернули) все эти другие участки, чтобы создать эту местную резервацию.И это стало очень ценной землей. Для любого из вас, кто будет в районе Вашингтона в ближайшие несколько месяцев, в Смитсоновском национальном музее американских индейцев есть действительно отличная выставка, посвященная именно этой резервации и многолетним судебным тяжбам этих коренных жителей, пытающихся не быть изгнанным с собственной земли.