Грунтовка глубокого проникновения хорошая: какая лучше, какую выбрать для ванной комнаты, лучшая при отделке сухими строительными смесями

Содержание

Грунтовка глубокого проникновения

Использование грунтовки – важный и обязательный этап проведения работ. Продуктом производят начальную обработку основания перед нанесением любых последующих отделочных материалов. Качественная грунтовка укрепляет основание, связывает пыль на его поверхности и уменьшает впитывающую способность. В результате шпатлевка или любой другой отделочный материал наносится равномерно, быстро и легко, а риск появления дефектов минимизируется.

Описание и сфера применения грунтовки глубокого проникновения

Одной из разновидностей грунтовок является грунтовка глубокого проникновения. Этот состав был разработан специально для самых сложных и проблемных оснований: старых, рыхлых и пористых стен. Грунтовка глубокого проникновения представляет собой жидкость, изготовленную на основе различных акриловых полимеров. Учитывая инновационный состав и особо малый размер частиц, она способна проникать глубоко в основание и «склеивать» его.

Только на скрепленное таким образом основание можно будет без опасения клеить плитку, наносить шпатлевку, клеить обои. В частности, именно глубоко проникающей грунтовкой нужно проводить обработку кирпичной стены перед нанесением краски. Укрепленные грунтом, швы не начнут крошиться со временем. Или обработку стены, которую решено побелить известью. Акриловые смолы свяжут побелку со стеной, и она не будет отслаиваться от стены. Продукт эффективно укрепляет поверхности из газобетонных и пенобетонных блоков, кирпича, гипсокартона, штукатурок различного состава и многих других поверхностей. Глубоко проникающая грунтовка используется для внутренних и наружных работ.

Совет профессионала: Не наносите грунтовку глубокого проникновения на гладкие поверхности, которые плохо впитывают воду – плитку, керамогранит, гладкие бетонные плиты перекрытия, а также на металлические основания или стены с жирными или битумными пятнами.

Технические характеристики грунтовки

Технические характеристики каждой конкретной грунтовки глубокого проникновения очень сильно зависят от производителя и, как следствие, ее химического состава.
Ориентировочное содержание нелетучих веществ обычно 12-20 % от общей массы жидкости.
Время высыхания нанесенного состава – 1-3 часа при нормальных погодных условиях, но может увеличиться и до 24 часов.
Благодаря введенным в состав продукта фунгицидным добавкам сдерживает появление плесени и различных грибков.
Способна выдержать до 5 циклов замораживания и оттаивания. Причем некоторые продукты способны выдержать температуру до -15°С без потери качества.
«Склеивает» рыхлое основание, но при этом не нарушает нормальных воздухообмен в помещении.
Способна снизить расход штукатурки, шпатлевки, обойного клея за счет более легкого и равномерного нанесения на основание.

Когда грунт высыхает, она образует на поверхности прозрачное покрытие.
Делает основание более стойким к механическим или даже химическим воздействиям.
Гарантирует отличное сцепление наносимого отделочного материала с поверхностью.

Технология нанесения и расход проникающей грунтовки

Технология нанесения грунтовки глубокого проникновения довольно проста.

Для начала со стены удаляются отваливающееся и осыпающееся старое покрытие. Грунтовка глубокого проникновения способна скрепить рыхлое основание, но никак не приклеить уже отслоившийся кусок штукатурки. Пыль нужно удалить метелкой или пылесосом.
Если грунтовка является концентратом, то он разбавляется чистой водой так, как это рекомендовано производителем на упаковке. Расход продукта на 1 м² находится зависит от степени концентрации и впитывающей способности основания и варьируется в пределах 80-200 мл.

Наносят грунт кисть, валиком и пульверизатором. Если основание очень пористое, то лучше нанести ее в два слоя. Не забывайте следить, чтобы температура воздуха во время нанесения грунта была в пределах +5 до + 30 ºС и поддерживалась нормальная влажность воздуха.

Совет профессионала:Очень удобный инструмент для распыления грунта вы можете сделать сами. Для этого распылитель с бутылки очистителя стекол переставьте на обычную на бутылку 1,5 л от напитка или минералки (резьбы на крышках совместимы).

Чем отмыть грунтовку

Что делать, если грунтовка глубокого проникновения случайно попала на некоторые поверхности, грунтовать которые мы не собирались? Поскольку покрытие имеет сложный химический состав, то удалить его может быть довольно трудно. Но на строительных форумах специалисты приводят несколько действенных способов:

С пластиковых поверхностей грунтовка удаляется содой и водой.
С керамической плитки отмыть следы помогает кислотное моющее средство «Силит».
Пятна грунтовки способна размягчить концентрированнаяуксуснаяэссенция. Под воздействием уксуса акриловые полимеры размягчаются и удаляются жесткой щеткой.

Как выбрать грунтовку

Чтобы выбрать правильный продукт и избежать ненужных разочарований, следует учесть несколько простых правил по выбору:

Не стоит покупать продукт неизвестного производителя. Ищите продукт известного производителя с хорошей репутацией
Ищите продукт исключительно в оригинальной таре производителя
В идеале старайтесь приобретать грунтовку глубокого проникновения и остальные отделочные материалы у одного и того же производителя. Такие продуктыбудут иметь «родной» состав и хорошо дополнять друг друга.

Наконец, выбирайте грунтовкуглубокого проникновения в зависимости от того, «на что» и «под что» она будет наноситься. То есть нужно четко знать, на какую поверхность будет наноситься грунт и какой отделочный материал будет нанесен на загрунтованную поверхность впоследствии.

Хорошая грунтовка-залог долговечности вашего ремонта

 Долговечность будущих декоративных покрытий и максимальное качество отделочных работ обеспечивают грунтовки. Прежде чем заняться укладкой плитки, штукатуркой стен, поклейкой обоев, нанесением краски, необходимо тщательно подготовить поверхность. Для этого и применяются грунтовки. Основной их задачей является обеспечение плотного сцепления основания с верхним слоем наносимого в дальнейшем покрытия. Назначение грунтовок — укрепление поверхностей, улучшение их адгезионных свойств, повышение водостойкости и щелочестойкости.

В нашем интернет магазине строительных материалов они представлены в достаточно широком ассортименте. Поэтому, прежде чем приобретать ту или иную марку грунтовки, необходимо понять, для какого типа поверхности и с какой целью она будет применяться.

Трио грунтовок Ceresit предназначено для подготовки к нанесению дальнейшего покрытия всех видов поверхностей. Грунтовку CT19 Бетоноконтакт лучше всего применять для обработки гладких бетонных поверхностей перед оштукатуриванием и плиточной облицовкой. Применение водно-дисперсионной грунтовки CT16 будет наиболее уместным для таких типов оснований, как известковые и цементные штукатурки, гипсовые штукатурки и шпаклевки, ДСП и гипсокартонные листы. Эта грунтовка выпускается белого цвета, но она колеруется в цвет любого покрытия. Грунтовка CT17 водно-дисперсионная. Она относится к грунтовкам глубокого проникновения и является универсальной, то есть пригодна для работы с любыми типами оснований.

Грунтовки Knauf представляют собой готовые к употреблению дисперсии на водной основе. Они не содержат растворителей. В линейке грунтовок Knauf можно подобрать именно ту, которая наиболее оптимально будет соответствовать требованиям пользователя. Knauf Isogrund хорошо подходит для обработки цементных штукатурок, причем неважно старых или новых. Knauf Putzgrund – хорошее решение для подготовки поверхности к нанесению декоративной штукатурки белого цвета. Knauf Tiefengrund быстро сохнущая грунтовка, она отлично укрепляет поверхность ослабленных оснований, на гипсовой и меловой основе.

Стирол-акрилатные грунтовки Волма изготавливают с добавлением антисептика. Это предохраняет поверхности от образования грибка, плесени и мха. Разбавлять водой эти грунтовки не нужно, они готовы к применению. Для работы со слабо впитывающими основаниями применяют грунтовку Волма-Контакт.

Грунтовка Волма-Интерьер служит для обработки поверхностей внутри помещения. Волма-Аква, Волма-Пласт и Волма-Универсал подойдут и для внутренних, и для наружных работ.

В линейке грунтовок российского производителя Старатели есть грунтовка для обработки невпитывающих поверхностей Бетон-Контакт. Грунтовка «Глубокого проникновения», представляющая собой сочетание воды, стирол-акриловой дисперсии, целевых добавок и антисептика, предназначена для работ в помещениях, в которых предусмотрен режим влажной дезинфекции.

Грунтовка «Бетонконтакт» компании Русеан хорошо зарекомендовала себя при работе с любыми видами поверхностей. В состав Грунтовки глубокого применения включены специальные антисептические и противогрибковые добавки.

Ассортимент немецкого производителя Dufa довольно разнообразен. Грунтовки отличаются типом и областью применения. Акрил-гидрозольный состав Tiefgrund LF применяют перед нанесением краски. Грунт-эмаль Expert PU Vorlack D 338 используется для покрытия радиаторов отопления и труб теплосетей.

Деревянные, металлические и стеклянные поверхности будет защищать универсальный аэрозоль-грунт Dufa Universal-Grundierspray. Предотвратить проникновение пятен никотина, воды, жира и копоти можно с помощью Isoliergrund. Металлические конструкции от коррозии защитит Zink-Alu-Spray. Putzgrund LF грунтовка предназначена для обработки всех типов поверхностей, как внутренних, так и наружных.

Грунтовка глубокого проникновения ThermoColor 10 л

Грунтовка глубокого проникновения

Состав, наносимый первым слоем на подготовленную к окраске поверхность для создания надёжного сцепления верхних (кроющих) слоев покрытия с обрабатываемой 
поверхностью и выравнивая её впитывающие способности.

Преимущества грунтовки глубокого проникновения ThermoColor:

  • Грунтовка глубокого проникновения, характеристики которой говорят о ее универсальности, наделена целым рядом преимуществ. Основное из них — уникальная способность проникать в самые глубинные слои поверхности.
  • Таким образом, можно даже старое и рыхлое основание превратить в отличную базу под самую современную отделку, не опасаясь за долговечность последней.
  • Пробираясь вглубь основания, грунтовка глубокого проникновения для стен упрочняет их и укрепляет, что и позволяет повысить эксплуатационный срок.
  • Достаточная паропроницаемость грунта превращает поверхность в дышащую, способствуя воздухообмену. А наличие фунгицидных добавок сводят вероятность образования грибка практически к нулю.
  • Глубоко проникающая грунтовка, обеспечивая воздухообмен, изолирует внутриполостные поры за счет силикона. То есть основание становится еще и водоупорным. Повышается и общая износоустойчивость слоя как к механическим, так и химическим воздействиям.
  • Благодаря способности выравнивать пористость основания, грунтовка проникающая значительно снижает расход декоративных отделочных материалов, в частности штукатурки, шпаклевки или краски.
  • Работа не сопровождается токсичными запахами. Наносить состав очень просто. Также хорошая грунтовка глубокого проникновения не только не токсична, но и не взрывоопасна.

Как сделать заказ

Оформите заказ на сайте или по телефону Внесите оплату любым удобным способом Ожидайте доставку заказа или заберите самостоятельно

Новый праймер с химическим связующим для повышения прочности сцепления с дентином

Коллагеновая матрица дентина, которая не полностью покрыта адгезивной смолой, подвержена деградации собственными коллагеназами во время процесса протравливания и полоскания, что способствует ухудшению адгезионной поверхности. Современные коммерческие адгезивы не содержат функциональных компонентов, которые могут образовывать ковалентные связи с коллагеновой матрицей дентина. В этом исследовании был синтезирован фотоотверждаемый альдегид, 4-формилфенилакрилат (ФА), который впервые был применен в качестве грунтовки в адгезивной стоматологии для ковалентного связывания с коллагеном. В качестве праймеров готовили опытные группы с разной концентрацией ФК (1%, 3%, 5%, 7%, 9%). Цитотоксичность оценивали с помощью окрашивания живых/мертвых клеток и анализа тиазолиловым синим тетразолия бромидом. Взаимодействие ФК с коллагеном исследовали с помощью инфракрасной Фурье-спектроскопии с нарушенным полным отражением, высвобождения гидроксипролина при распаде коллагеназой I типа и термогравиметрического анализа. Оптимальную группу выбирали по степени превращения двух универсальных клеев и делили в зависимости от времени обработки (20 с, 30 с, 1 мин, 2 мин).Характеристики сцепления оценивали по прочности на микрорастяжение до и после старения. Наконец, поверхность соединения наблюдали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии и сканирующего электронного микроскопа. Результаты показали, что FA продемонстрировал хорошую биосовместимость, способность к модификации дентина и инфильтрацию. Он не только эффективно сшивает коллаген дентина, улучшая его устойчивость к ферментативному гидролизу и модифицируя поверхность адгезива, но также потенциально действует как разбавляющий мономер, вызывая глубокое проникновение мономеров адгезивной смолы в дентин. Прочность склеивания после старения была улучшена без ущерба для степени превращения двух коммерческих клеев. Столь заметные преимущества использования FA для улучшения адгезионных свойств способствуют дальнейшему его применению в адгезивной стоматологии.

Ключевые слова: альдегиды; биосовместимость; биомодификация; коллагеновая матрица; сшивание; фотоотверждаемый.

Комплексная система для быстрого и чувствительного раннего обнаружения SARS-CoV-2 в средах с ограниченными ресурсами и полевых испытаниях с использованием «лаборатории в рюкзаке» стоимостью 51 долл. США

Abstract

COVID-19 выявил резкое неравенство между богатыми и бедными ресурсами странами.Международные усилия под руководством ООН и ВОЗ, такие как COVAX, предоставили вакцины против SARS-CoV-2, но половина африканских стран имеют менее 2% вакцинированного населения, и только 15 достигли 10% к октябрю 2021 года, что еще больше усугубляет положение местных жителей. восстановление экономики. Ключом к этой реализации и предотвращению дальнейших мутаций и распространения является частота добровольного [бессимптомного] тестирования. Его ограничивают дорогие тесты ПЦР и LAMP, неудобные зонды глубоко в горле или носу, а также доступность аппаратного обеспечения для администрирования в удаленных местах.Существует острая необходимость в недорогой комплексной системе для проведения чувствительных и надежных неинвазивных тестов в условиях ограниченных ресурсов и полевых испытаний. Мы представляем неинвазивный набор для колориметрического тестирования LAMP на основе слюны и систему «лаборатория в рюкзаке» за 51 доллар, которая обнаруживает всего 4 копии вирусной РНК на мкл. Он состоит из восьми химикатов, термометра, термоса, двух микропипеток и центрифуги с электронным управлением на 1000–4000 rcf, изготовленной из переработанных компьютерных жестких дисков (CentriDrive).Центрифуга включает в себя напечатанный на 3D-принтере ротор и перезаряжаемую литий-ионную батарею на 12 В, а ее стандарт на 12 В также позволяет подключаться напрямую к автомобильным батареям, что позволяет использовать этот и другие тесты в полевых условиях в условиях слабой инфраструктуры. Тест занимает 90 минут, чтобы обработать 6 образцов, и стоимость реагентов составляет 3,5 доллара США за образец. Неинвазивный характер тестирования слюны позволит повысить проникновение тестирования и более широкое внедрение теста в разных культурах и условиях (включая лагеря беженцев и зоны бедствия).Прилагаемая графическая процедура делает тест пригодным для самостоятельного тестирования в домашних условиях, проведения его в полевых условиях или в мобильных центрах тестирования минимально обученным персоналом.

Образец цитирования: Lin EE, Razzaque UA, Burrows SA, Smoukov SK (2022) Сквозная система для быстрого и чувствительного раннего обнаружения SARS-CoV-2 для сред с ограниченными ресурсами и полевых испытаний с использованием лаборатория в рюкзаке. ПЛОС ОДИН 17(1): e0259886. https://doi.org/10.1371/журнал.pone.0259886

Редактор: Эцуро Ито, Университет Васэда: Васэда Дайгаку, ЯПОНИЯ

Получено: 23 июня 2021 г. ; Принято: 28 октября 2021 г .; Опубликовано: 26 января 2022 г.

Авторское право: © 2022 Lin et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные содержатся в документе и в его вспомогательных информационных файлах.

Финансирование: Авторы благодарят CSC за стипендию Э Лин, стипендию EPSRC EP/R028915/1 и Европейское космическое агентство MAP PROJECT WHISKIES.to SKS, а также Исследовательский фонд SEMS Лондонского университета королевы Марии.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение/Общие сведения

Пандемия коронавирусной болезни 2019 года (COVID-19) в настоящее время насчитывает более 240 миллионов подтвержденных случаев во всем мире, число новых случаев увеличивается более чем на полмиллиона в день во время второй волны пандемии и приводит к более чем 5 миллионам смертей к концу октября 2021 г. [1].Международные усилия, такие как COVAX под руководством ООН и ВОЗ, обнадеживают, но до полной вакцинации еще 2–3 года. Существуют реальные опасения по поводу перегрузки систем здравоохранения во многих странах. Поскольку к октябрю 2021 года более чем в половине из 54 стран вакцинация против COVID-19 достигла менее 2%, а только в 15 странах вакцинация против COVID-19 достигла 10%, цель защитной вакцинации в Африке будет поставлена ​​на будущее [2]. Дешевое и быстрое тестирование необходимо как в домашних условиях, так и в пунктах оказания медицинской помощи (POC), а также в странах, богатых и бедных ресурсами, для точного отличия COVID-19 от других респираторных заболеваний [3, 4].Такая система тестирования необходима для защиты медицинских работников, работающих на переднем крае, для выявления и отслеживания контактов с инфекциями, для обеспечения возможности поездок и для обеспечения более взвешенных ответных мер на пандемию, когда ограниченное проведение тестов требует полной изоляции [5]. Такие же затраты на один тест, как и в Великобритании, дополняются чрезвычайными расходами на персонал на месте в размере 5000–6000 долларов США на человека в день в Калифорнии [6].

Помимо высокой стоимости, инвазивность и болезненность самого теста создают дополнительные препятствия для соблюдения режима и частого тестирования.В настоящее время золотой стандарт обнаружения COVID-19 [7-9] ПЦР-тест требует неприятного ощущения от втыкания зондов глубоко в ноздри, что отвлекает людей от тестирования. Чтобы улучшить опыт, скорость и стоимость, во всем мире начинают использоваться другие методы [10, 11]. Изотермическая амплификация, опосредованная петлей обратной транскрипции (RT-LAMP), представляет собой одноэтапный метод амплификации нуклеиновых кислот, который имеет аналогичную чувствительность к многоцикловой ПЦР [12, 13] и может быть выполнен на образцах слюны [14, 15]. .Со времени пионерской работы Нотоми [14] он широко используется в диагностике инфекционных заболеваний [16–21]. Реакция LAMP амплификации ДНК при постоянной температуре была объединена в анализе с процессом обратной транскрипции (RT-LAMP) для нацеливания и обнаружения последовательностей РНК, в частности, РНК SARS-CoV-2 [22–25]. Это тест с высокой чувствительностью и высокой специфичностью, а его минимальные требования к оборудованию и реагентам делают его подходящим кандидатом для экономичного и быстрого обнаружения вирусов на месте.Тем не менее, такие 120-минутные «безопасные для полетов» испытания LAMP на месте в Хитроу стоят 85 фунтов стерлингов (118 долларов США) и более [26]. Кроме того, такие тесты предполагают наличие дорогостоящих инструментов, таких как центрифуги или флуоресцентные ридеры, что делает их непригодными для тестирования на дому и в удаленных местах. Для таких сред также необходимо учитывать низкую стоимость всей системы.

Недорогие тесты, проводимые в жилых помещениях, могут повысить соответствие тестированию. Кроме того, то же самое можно сказать и о неинвазивных тестах в странах и культурах, где стоимость процедуры или страх перед процедурой могут помешать тестированию [27, 28]. В дополнение к предельным затратам на образец, для многих объектов с меньшим объемом необходимо также учитывать дополнительные расходы на инфраструктуру и обучение персонала. Предлагаются недорогие подходы как для тестов RT-LAMP, так и для тестов RT-qPCR [29].

Они варьируются от очень дешевых (10 долларов США) наборов устройств, которые могут работать даже без электричества [30], до более дорогого оборудования стоимостью 300 долларов США, которое можно использовать для проведения одновременных тестов в 96-луночных планшетах и ​​последующего считывания флуоресцентных результатов с помощью Источник УФ и смартфон или планшет [29].Надлежащая (основной капитал) стоимость таких приборов сильно зависит от необходимого количества тестов, которые должны выполняться за один раз, долговечности и стабильной работы оборудования, а также факторов, специфичных для конкретной ситуации. К таким факторам относится удаленность испытуемых от других удобств, например. возможность зарядки от сети или автомобильных аккумуляторов, охлаждение для РНК-праймеров и т. д. Еще одним компонентом фиксированных (человеческих) капитальных затрат на эти тесты является обучение и подготовка рабочих. Следовательно, процедуры должны быть простыми для выполнения даже при наличии лишь базовых навыков грамотности и минимальной подготовки, а в идеале — при наличии инструкций на нескольких языках.Таким образом, чтобы максимизировать доступность и влияние тестирования на COVID-19 во всем мире, инструменты и протоколы должны быть адаптированы к ситуациям, чтобы минимизировать стоимость местной системы тестирования [31].

Здесь мы сообщаем о неинвазивной, быстрой и недорогой системе тестирования на COVID-19, которая заменит или дополнит ПЦР-тесты. Он состоит из системы «лаборатория в рюкзаке» за 51 доллар (включая высокопроизводительную электронную центрифугу за 28 долларов, сделанную из переработанных жестких дисков компьютеров, термометр, термос и две микропипетки за 20 долларов) и протокол RT-LAMP. из Гарвардской медицинской школы [32], объединенных в единый тестовый набор, который можно надежно и воспроизводимо использовать дома или в удаленных полевых условиях (рис. 1).Системные инструкции включают в себя визуальный протокол с одноразовыми упаковками реагентов, дополненный графическими инструкциями по смешиванию пронумерованных упаковок с цветовой маркировкой, которым может следовать минимально обученный персонал. Тестирование одного образца занимает около 80 минут, а тестирование 6 образцов — 90 минут. Тест обеспечивает обнаружение SARS-CoV-2, стоимость реагентов и расходных материалов составляет примерно 3,5 доллара США за образец. Такой широко доступный неинвазивный, быстрый, чувствительный и надежный тест на COVID может облегчить стресс во многих системах здравоохранения.

Рис. 1. CentriDrive и реагенты для анализа LAMP.

(а) CentriDrive. (b) Принципиальная схема CentriDrive. 1. Переключатель. 2. Потребляемая мощность. 3. ЖК. 4. Макет. 5. Гиккреит Нано. 6. Инфракрасный датчик. 7. ЭСК. 8. Потенциометр. 9. Мотор. (c) Список всех реагентов для анализа LAMP. Химическое вещество А, буфер для лизиса/инактивации. Химикат B.1, порошок NaI. Химикат B.2, 1 N HCl. Химическая В.3, Тритон Х-100. Химическое вещество C, суспензия для связывания силикагеля. Химикат D, 80% раствор этанола. Химический Е.1, буфер PBS. Химикат E.2, Раствор грунтовки. Химикат E.3, WarmStart ® Colorimetric LAMP 2X Master Mix. Химическое вещество E.4, раствор SARS-CoV-2. * Arduino nano показан на рисунке из-за ограничений программного обеспечения для рисования, но в финальном тесте использовалась Geekcreit Nano.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0259886.g001

Оборудование/Материалы и методы

Компоненты для CentriDrive

CentriDrive (рис. 1а) — это недорогое медицинское устройство, собранное из недорогих новых и переработанных компонентов, ориентировочная стоимость которого составляет 28 долларов США.Помимо текущего использования в тесте на коронавирус, эта центрифуга использовалась для демонстрации разделения ДНК в средних школах Великобритании. Это недорогое устройство можно использовать в самых разных условиях с ограниченными ресурсами. Его можно собрать в местных мастерских и на предприятиях по монтажной схеме рис. 1б вместе со следующими инструментами: паяльник, отвертка Т6. Основные компоненты перечислены ниже.

Вращающийся жесткий диск

Жесткие диски с вращающимися шпинделями сконструированы настолько хорошо, что обычно их выбрасывают вместе с ненужными компьютерами в рабочем состоянии.В фермах облачных вычислений, где они используются постоянно, их отказ составляет в среднем всего 1–2% в год. Из неработающих жестких дисков подавляющее большинство выходит из строя из-за повреждения головки или заклинивания пластины. Следовательно, после демонтажа головки и пластины (для отдельной утилизации, устранения любых проблем с данными/конфиденциальностью) двигатель, элементы управления и шасси жесткого диска можно использовать для центрифуги. Двигатели шпинделя в жестких дисках рассчитаны на работу на высоких скоростях и имеют длительный срок службы в среднем 3–5 лет.Они хорошо сбалансированы и хорошо контролируют скорость вращения, что делает их идеальными для диагностической центрифуги.

Ротор центрифуги, напечатанный на 3D-принтере

Ротор рассчитан на 6 микроцентрифужных пробирок объемом 1,5 мл и имеет радиус ротора 3,5 см. Он напечатан из 22 г пластиковой нити PLA (полимолочной кислоты) с использованием Ultimaker 3.0, печать занимает около 4 часов. Ротор крепится к двигателю с помощью винтов, которые первоначально удерживали пластину. Используя общедоступный стандартный жесткий диск на 7200 об/мин, центрифуга с жестким диском может достигать максимальной скорости 11650 об/мин (5320 об/мин) и 7600 об/мин (2260 об/мин) при загрузке микроцентрифужными пробирками.С серверными жесткими дисками со скоростью вращения 10 000 об/мин скорость может достигать более 4 000 об/мин. Скорость регулируется потенциометром, измеряется ИК-датчиком, установленным в радиусе действия ротора, и отображается на ЖК-дисплее (жидкокристаллическом дисплее), управляемом микроконтроллером Geekcreit Nano. Стабильность скорости CentriDrive проверялась каждую минуту в течение 15 минут (см. рис. S7 в файле S1).

Другие электронные компоненты (имеющиеся в продаже)

Даются общие описания компонентов, а более подробная информация, стоимость и источники перечислены в дополнительных материалах.Компоненты: бесщеточный постоянный ток 5–12 В (BLDC), электронный регулятор скорости (ESC) 30 А, Geekcreit Nano, потенциометры 10K, источник питания 12 В, кулисный переключатель и инфракрасный датчик.

Материалы для обнаружения

TCEP-HCl, TritonX-100 были приобретены у Tokyo Chemical Industry. ЭДТА, NaI, диоксид кремния, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 и вода без нуклеаз были приобретены у Sigma-Aldrich Company. Грунтовки были приобретены в компании Thermo-Fisher.Матричная вирусная РНК SARS-CoV-2 была приобретена у Twist Bioscience. Мастер-микс WarmStart ® Colorimetric LAMP 2X был приобретен в New England Biolabs. Все реагенты имели квалификацию «х.ч.» и использовались без дополнительной очистки.

Модифицированные реакционные компоненты RT-LAMP [32]

Chemical A. Буфер для лизиса/инактивации.

В центрифужную пробирку объемом 1,5 мл добавляли 0,5 мл 0,5 М TCEP-HCl, 0,1 мл 0,5 М ЭДТА (pH = 8), 0,115 мл 10 н. NaOH и 0,285 мл водопроводной воды, чтобы получить 1 мл 100-кратного буфера для инактивации. .Хранится при температуре 4°C для последующего использования.

Chemical B. Связывающий раствор NaI.

В пробирку объемом 10 мл, химическое вещество B.1, 450 мг порошка NaI и 4 мл воды, чтобы получить 10 мас.% раствора NaI, затем химическое вещество B.2, 50 мкл 1 н. HCl, химическое вещество B.3, 100 мкл TritonX-100. добавляли для образования связывающего раствора Chemica B NaI. Химическое вещество B должно быть свежеприготовленным перед тестированием.

Chemical C. Суспензия для связывания кремнезема.

В центрифужную пробирку на 100 мл добавили 5 г диоксида кремния 325 меш и 50 мл воды.Слейте надосадочную жидкость после отстаивания кремнезема в течение 1 часа. Добавляли еще одну порцию 50 мл воды, чтобы получить суспензию диоксида кремния. Эта суспензия работает в сочетании со связующим раствором NaI, добавляемым в соотношении 50:1.

Chemical D. 80% раствор этанола.

Промывочный раствор в этаноле готовили путем разбавления 80 мл абсолютного этанола 20 мл воды.

Химический буфер E.1 PBS.

Фосфатно-солевой буфер (PBS) был приготовлен путем растворения 0.2798 г K 2 HPO 4 и 0,0205 г KH 2 PO 4 на 50 мл воды, чтобы pH стал ≈7,8. Если pH слишком высок, он не покажет изменение цвета с розового на желтый. Если рН слишком низкий, изменение цвета будет трудно различить. Хранить при температуре 4°C для последующего использования.

Раствор грунтовки
Chemical E.2.

Праймеры (Таблица 1) отдельно растворяли в воде без нуклеаз или в водопроводной воде. Последовательности взяты из Rabe and Cepko 2020 [32]. Смесь праймеров объединяли с 16 мкл FIP, 16 мкл BIP, 2 мкл F3, 2 мкл B3, 4 мкл LF, 4 мкл LB и доводили до 100 мкл водой для приготовления 10-кратного раствора. Их хранили при 4°C для последующего использования.

Chemical E.3 WarmStart
® колориметрический LAMP 2X мастер-микс.

Используется в том виде, в котором он был приобретен, и хранится при температуре -20°C. Смесь представляет собой специальный малобуферный реакционный раствор, содержащий феноловый красный в качестве видимого индикатора pH для быстрого и легкого обнаружения реакций изотермической амплификации, опосредованной петлей обратной транскрипции (RT-LAMP) [33]. Вся система разработана для обеспечения быстрого и четкого визуального обнаружения амплификации, основанной на образовании кислоты и последующем падении pH [34], что приводит к изменению цвета раствора с розового на желтый [35].

Химическая вирусная РНК-матрица E.4.

Разводится водой без нуклеаз и водопроводной водой по отдельности. Хранится при температуре -80°C для последующего использования. Хотя мы использовали эту вирусную РНК-матрицу в качестве положительного эталона, ее не нужно использовать в реальном тесте.

Заявление об этике

Для растворов, где слюна использовалась в смеси с буферами, использовалась только слюна, собранная авторами самостоятельно. После эксперимента его благополучно утилизировали как биоотходы. Было сочтено, что протокол не требует утверждения Комитетом по этике исследований Университета королевы Марии.

Результаты

РНК SARS-CoV-2 смешивали со слюной в различных концентрациях и тестировали с помощью системы CentriDrive для определения чувствительности обнаружения вируса. Результаты показали, что реакция RT-LAMP после центрифугирования может обнаруживать SARS-CoV-2 при 4 копиях вирусного генома/мкл. Эксперимент повторяли девять раз, и во всех случаях обнаружение было успешным. Контрольный эксперимент не содержал РНК вируса SARS-CoV-2 и не вызывал изменения цвета раствора LAMP (рис. 2).Хотя мы обычно использовали воду, свободную от нуклеаз, для приготовления исходного раствора РНК SARS-CoV-2, мы подтвердили, что для обнаружения вирусной РНК вскоре после сбора водопроводная вода достигала чувствительности 8 копий/мкл. Как на CentriDrive, так и на коммерческой центрифуге (SciSpin-Micro, № по каталогу: 911315410035) самая низкая обнаруженная концентрация составила 4 копии вирусного генома/мкл. В проиллюстрированной процедуре используется минимальное оборудование и простая процедура, которую можно выполнять как дома, так и в полевых центрах оказания медицинской помощи (POC).

Рис. 2. Результаты реакции LAMP.

После центрифугирования протокол LAMP может эффективно обнаруживать синтетическую вирусную РНК до 4 копий на мкл в слюне. (а) Пробирки показывают успешную амплификацию 100, 200, 400, 2000, 20000 копий геномов контрольной РНК COVID соответственно. Крайний левый образец показывает контрольный цвет при отсутствии реакции LAMP с 0 геномами контрольной РНК COVID. (b) Образцы контрольной и вирусной РНК, амплифицированные с помощью реакции LAMP с использованием водопроводной воды, дают результаты, сравнимые с водой без нуклеаз.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0259886. g002

Процедура обнаружения

Соберите около 500 мкл слюны в центрифужную пробирку объемом 1,5 мл. Необходимо убедиться, что участники не жевали жвачку, не курили, не ели и не пили в течение 30 минут до сдачи образца. Добавьте 5 мкл химического вещества A (неактивный раствор для лизиса), смешайте их и поместите пробирку в кипящую воду и инкубируйте в течение 5 минут, затем используйте CentriDrive для вращения в течение 1 минуты на максимальной скорости (~ 7600 об/мин).Соберите супернатант в новую центрифужную пробирку объемом 1,5 мл.

К раствору надосадочной жидкости добавьте 250 мкл химического вещества B (связывающий реагент NaI) и 5 ​​мкл химического вещества C (взвесь кремнезема), смешайте их и инкубируйте при комнатной температуре в течение 10 минут. Затем центрифугировать в течение 30 секунд и слить надосадочную жидкость, сохранив осадок.

В пробирку с осадком добавить 700 мкл реагента D (80% этанола), перемешать и центрифугировать 30 секунд на максимальной скорости. Слейте этанол и держите крышку открытой для испарения остаточного этанола при комнатной температуре.Не пытайтесь нагревать выше 70°C, чтобы ускорить процесс испарения, так как это может привести к деградации РНК. Не дуйте в пробирку газом, который может сдуть РНК.

В пробирку с осадком кремнезема добавьте 2,5 мкл химического вещества E.2 (праймеры для LAMP), 12,5 мкл химического вещества E.4 (WarmStart ® Colorimetric LAMP 2X Master Mix), химического вещества E.3 (раствор SARS-CoV-2, добавить в качестве положительного сравнения) и достаточное количество химического вещества E.1 (раствор PBS), чтобы довести раствор до 25 мкл, смешать их с помощью вортексера при скорости около 800 об/мин в течение 5 секунд или энергично встряхнуть вручную в течение 30–60 с, а затем центрифугированием при 2000 rcf в течение 30 секунд, чтобы весь материал собрался на дне пробирки.В противном случае реакции может не быть. Затем инкубируйте реакционную смесь при 65°C в течение 30 минут. Положительные реакции станут желтыми, а отрицательные контроли останутся розовыми (рис. 3).

Рис. 3. Методы и этапы процесса описания реакции CentriDrive-LAMP.

Следующие реагенты обозначены буквами: A. 5 мкл реагента A; B. 250 мкл химиката B; C. 5 мкл химического вещества C; D. 700 мкл химического вещества D; E. 2,5 мкл химиката E.2, 12,5 мкл химиката E.4, химиката E.1 и химиката E.3 в сумме составляют 10 мкл, чтобы довести раствор до 25 мкл.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0259886.g003

Механизм анализа LAMP

В щелочных условиях и при высокой температуре мембраны и белки будут быстро денатурированы, в то время как ковалентно связанная кольцевая плазмидная ДНК останется нетронутой в супернатанте. Получите необходимую нуклеиновую кислоту, собрав супернатант после центрифугирования (рис. 4а).

Нуклеиновые кислоты будут связываться с кремнеземом в присутствии хаотропных солей, таких как используемый здесь NaI [36, 37].Получите нуклеиновую кислоту, связанную с кремнеземом, собрав осадок после центрифугирования (рис. 4b).

В реакции LAMP целевую последовательность амплифицируют при постоянной температуре 60–65°C с использованием трех наборов праймеров и полимеразы. Первым этапом является обратная транскрипция РНК в ДНК в присутствии обратной транскриптазы. Тогда каждый из праймеров, обладая последовательностью, комплементарной одной цепи участка амплификации на 3′-конце и идентичной внутренней области той же цепи на 5′-конце, в итоге образует гантелеподобную структуру [15].Добавление в реакцию петлевых праймеров ускоряет амплификацию ДНК [38]. Амплифицированные продукты снова проходят через повторяющиеся реакции элонгации, в результате которых образуются амплифицированные ДНК-продукты различной длины стебля [39]. (рис. 4в).

Процесс синтеза ДНК представляет собой образование фосфодиэфирной связи между входящим дезоксинуклеозидтрифосфатом и концевым нуклеотидом праймера, катализируемое ДНК-полимеразами. Это высвободит пирофосфат (PPi) [40]. (Рис. 4d) Гидролиз пирофосфата приводит к образованию двух протонов водорода, которые снижают pH раствора и обнаруживаются по изменению цвета цветового индикатора pH.

Выводы

Используя метод тестирования LAMP в сочетании с нашей системой «лаборатория в рюкзаке» стоимостью 51 доллар США, изображенной на рис. S11 (включенной в файл S1), мы можем успешно обнаружить SARS-CoV-2 при 4 вирусных геномах/мкл. . Эта чувствительность обнаружения намного ниже, чем у инфицированных людей [41], и выгодно отличается от коммерческих тестов LAMP, которые обнаруживают 4 вирусных генома/мкл [42]. Коммерческие тестовые наборы LAMP, продаваемые тестирующим компаниям, стоят 5–17 фунтов стерлингов (7–24 доллара США) оптом. Тест быстрый и дешевый, занимает менее 90 минут и стоит 3 доллара.5 за образец. Описанные здесь тест и оборудование могут стать основой автономной системы и комплексного решения для тестирования на COVID-19. Описанная выше центрифуга также может использоваться как часть другого коммерческого теста LAMP для завершения аппаратной системы и комплексного решения.

Вспомогательная информация

Файл S1. Дополнительные материалы.

Включая время анализа для одного образца и шести образцов, рецепт центрифуги с жестким диском, консистенцию скорости CentriDrive, характеристику скорости вращения CentriDrive при различном напряжении, результаты реакции LAMP с использованием коммерческой центрифуги вместо CentriDrive, набор прототипов с флаконами в нескольких мешочках.

10.1371/journal.pone.0259886.s001

(PDF)

Благодарности

Мы благодарим Белинду Неджай, директора лаборатории молекулярной эпидемиологии, за мнение о включении коммерческого теста LAMP в тысячи тестов на COVID-19, ежедневно проводимых в QMUL. Мы благодарим Jianxin Chen и David Gould за первоначальное обсуждение экспериментов LAMP. Авторы выражают благодарность Фабьену Пьюцци за полезные обсуждения его недорогой центрифуги, спроектированной на базе двигателя дрона.

Каталожные номера

  1. 1. ВОЗ Коронавирусная болезнь (COVID-19) Информационная панель: Всемирная организация здравоохранения; [цитировано 27 августа 2021 г. и 26 октября 2021 г.]. https://covid19.who.int.
  2. 2. Пятнадцать африканских стран достигли цели вакцинации от COVID-19 на уровне 10%: Всемирная организация здравоохранения; [цитировано 26 октября 2021 г.]. https://www.afro.who.int/news/fifteen-african-countries-hit-10-covid-19-vaccination-goal.
  3. 3. Сонгок Э. Устойчивый на местном уровне подход к тестированию на COVID-19 в Африке.Ланцет Микроб. 2020;1(5). пмид:33521721
  4. 4. Адеподжу П. Борьба Африки с неадекватным тестированием на COVID-19: The Lancet Microbe; 2020 [цитировано 21 марта 2021 г.]. https://www.thelancet.com/journals/lanmic/article/PIIS2666-5247(20)30014-8/fulltext.
  5. 5. Wang YC, Lee YT, Yang T, Sun JR, Shen CF, Cheng CM. Современные диагностические инструменты для коронавирусов – от лабораторной диагностики до POC-диагностики COVID-19. Биоинженерия и трансляционная медицина. 2020.пмид:32838038
  6. 6. СТАНДАРТНОЕ СОГЛАШЕНИЕ. 2020 [цитировано 21 марта 2021 г.]. https://files.covid19.ca.gov/pdf/Verily-life-sciences-LLC-OES-6155.pdf.
  7. 7. Тахамтан А., Ардебили А. ОТ-ПЦР в реальном времени при обнаружении COVID-19: проблемы, влияющие на результаты. Экспертиза молекулярной диагностики. 2020;20(5):453–4. пмид:32297805
  8. 8. Оливейра Б.А., Оливейра ЖК, Сабино Э.С., Окей ТС. SARS-CoV-2 и болезнь COVID-19: мини-обзор методов диагностики.Revista do Instituto de Medicina Tropical в Сан-Паулу. 2020;62. пмид:32609256
  9. 9. Бастин С.А., Нолан Т. RT-КПЦР-тестирование SARS-CoV-2: праймер. Международный журнал молекулярных наук. 2020;21(8):3004. пмид:32344568
  10. 10. Уорд С., Линдсли А., Кортер Дж., Ассаад А. Клиническое тестирование на COVID-19. J Аллергия Клин Иммунол. 2020;146(1):23–34. Эпаб 2020/05/24. пмид:32445839.
  11. 11. Чау Ч., Строуп Д. Д., Фигг В. Д. Технология клинической диагностики и тестирования COVID-19.Фармакотерапия: Журнал фармакологии человека и лекарственной терапии. 2020;40(8):857–68. пмид:32643218
  12. 12. Нагура-Икеда М., Имаи К., Табата С., Миёси К., Мурахара Н., Мизуно Т. и др. Клиническая оценка самостоятельно собранной слюны с помощью количественной обратной транскрипции-ПЦР (RT-qPCR), прямой RT-qPCR, обратной транскрипции – петлевой изотермической амплификации и экспресс-теста на антиген для диагностики COVID-19. Журнал клинической микробиологии. 2020;58(9). пмид:32636214
  13. 13.Baek YH, Um J, Antigua KJC, Park JH, Kim Y, Oh S и др. Разработка изотермической амплификации, опосредованной обратной транскрипционной петлей, в качестве метода быстрого раннего обнаружения нового SARS-CoV-2. Новые микробы заражают. 2020;9(1):998–1007. Эпаб 2020/04/21. пмид:32306853.
  14. 14. Нотоми Т., Окаяма Х., Масубучи Х., Йонекава Т., Ватанабэ К., Амино Н. и др. Петлевая изотермическая амплификация ДНК. Исследование нуклеиновых кислот. 2000;28(12):e63–e. пмид:10871386
  15. 15.Notomi T, Mori Y, Tomita N, Kanda H. Петлевая изотермическая амплификация (LAMP): принцип, особенности и перспективы на будущее. J микробиол. 2015;53(1):1–5. Эпублик 2015/01/06. пмид: 25557475.
  16. 16. Фукута С., Иида Т., Мизуками Ю., Исида А., Уэда Дж., Канбе М. и др. Обнаружение вируса мозаики японского ямса с помощью RT-LAMP. Арх Вирол. 2003;148(9):1713–20. Эпб 2003/09/25. пмид: 14505084.
  17. 17. Аонума Х., Йошимура А., Кобаяши Т., Окадо К., Бадоло А., Нельсон Б. и др.Единая реакция LAMP на основе флуоресценции для выявления нескольких паразитов у комаров. Опыт Паразитол. 2010;125(2):179–83. Эпублик 13.01.2010. пмид: 20064511.
  18. 18. Фукута С., Такахаши Р., Куроянаги С., Мияке Н., Нагаи Х., Судзуки Х. и др. Обнаружение Pythium aphanidermatum в томате с помощью петлевой изотермической амплификации (LAMP) с видоспецифичными праймерами. Европейский журнал патологии растений. 2013;136(4):689–701.
  19. 19. Кайпанг К.М., Харагути И., Охира Т., Хироно И. , Аоки Т.Быстрое обнаружение иридовируса рыб с помощью петлевой изотермической амплификации (LAMP). Дж. Вироловые методы. 2004;121(2):155–61. Эпб 2004/09/24. пмид: 15381352.
  20. 20. Се К., Маг П.Л., Чордаш А.Т., Эйзенштейн М., Сох Х.Т. Одновременное устранение переходящего загрязнения и обнаружение ДНК с помощью петлевой изотермической амплификации с добавлением урацил-ДНК-гликозилазы (UDG-LAMP). Химическая коммуна (Кэмб). 2014;50(28):3747–9. Эпублик от 01.03.2014. пмид: 24577617.
  21. 21. Дуань И, Гэ С, Чжан С, Ван Дж, Чжоу М.Метод быстрого обнаружения патогена растений Sclerotinia sclerotiorum, основанный на петлевой изотермической амплификации (LAMP). Австралазийская патология растений. 2013;43(1):61–6.
  22. 22. Yu L, Wu S, Hao X, Li X, Liu X, Ye S и др. Быстрое колориметрическое обнаружение коронавируса COVID-19 с использованием диагностической платформы изотермической амплификации, опосредованной обратной транскрипцией (RT-LAMP): iLACO. medRxiv. 2020.
  23. 23. Zhang Y, Odiwuor N, Xiong J, Sun L, Nyaruaba RO, Wei H, et al.Быстрое молекулярное обнаружение РНК вируса SARS-CoV-2 (COVID-19) с использованием колориметрической лампы. medRxiv. 2020:2020.02.26.20028373.
  24. 24. Кашир Дж., Якинуддин А. Анализы изотермической амплификации, опосредованной петлей (LAMP), как экспресс-диагностика COVID-19. Мед Гипотезы. 2020;141:109786. Эпублик 2020/05/04. пмид:32361529.
  25. 25. Томпсон Д., Лей Ю. Мини-обзор: Недавний прогресс в RT-LAMP позволил обнаружить COVID-19. Отчеты датчиков и приводов. 2020;2(1).
  26. 26.Аэропорт Хитроу. 2021. Тест Covid 19: Хитроу; 2021 [цитировано 27 августа 2021 г.]. https://www.heathrow.com/at-the-airport/fly-safe/covid-19-test.
  27. 27. Пасомсуб Э., Ватчарананан С.П., Буньяват К., Джанчомпу П., Вонгтабтим Г., Суксуван В. и др. Образец слюны как неинвазивный образец для диагностики коронавирусной болезни 2019: перекрестное исследование. Клиническая микробиология и инфекции. 2020. пмид:32422408
  28. 28. Ваз С.Н., Сантана ДСД, Нетто Э.М., Педросо С., Ван В.К., Сантос FDA и др.Слюна является надежным неинвазивным образцом для обнаружения SARS-CoV-2. Бразильский журнал инфекционных заболеваний. 2020;24(5):422–7. пмид:32888905
  29. 29. Арумугам А., Фарон М.Л., Ю П., Маркхэм С., Вонг С. Анализ быстрого обнаружения COVID-19 RT-PCR в условиях ограниченных ресурсов. 2020.
  30. 30. Ли Э., Ларсон А., Котари А., Пракаш М. Handyfuge-LAMP: недорогое и не требующее электричества центрифугирование для изотермического обнаружения SARS-CoV-2 в слюне. medRxiv. 2020:2020.06.30.20143255.
  31. 31. Манеро А., Смит П., Кунц А., Домбровски М., Спаркман Дж., Курбин Д. и др. Использование возможностей 3D-печати во время кризиса: рекомендации для распределенного производства медицинского оборудования в связи с COVID-19. Быстрое реагирование. Международный журнал экологических исследований и общественного здравоохранения. 2020;17(13):4634. пмид:32605098
  32. 32. Rabe BA, Cepko C. Обнаружение SARS-CoV-2 с использованием изотермической амплификации и быстрого и недорогого протокола для инактивации и очистки образцов.Труды Национальной академии наук. 2020;117(39):24450–8. пмид:325
  33. 33. WarmStart ® Колориметрическая лампа 2X Master Mix: NEW ENGLAND BioLabs; [цитировано 21 марта 2021 г.]. https://international.neb.com/products/m1800-warmstart-colorimetric-lamp-2x-master-mix-dna-rna.
  34. 34. Мори Ю., Китао М., Томита Н., Нотоми Т. Турбидиметрия реакции LAMP в реальном времени для количественного определения матричной ДНК. Журнал биохимических и биофизических методов. 2004;59(2):145–57.пмид:15163526
  35. 35. Солк Дж.Э., Янгнер Дж., Уорд Э.Н. Использование изменения цвета фенолового красного в качестве индикатора при титровании вируса полиомиелита или антител к нему в системе тканевой культуры. Американский журнал гигиены. 1954; 60 (2): 214–30. пмид:13197372
  36. 36. Фогельштейн Б., Гиллеспи Д. Препаративная и аналитическая очистка ДНК от агарозы. Труды Национальной академии наук. 1979;76(2):615–9. пмид: 284385
  37. 37. Boom R, Sol CJ, Salimans MM, Jansen CL, Wertheim-Van Dillen PM, Van Der Noordaa J.Быстрый и простой метод очистки нуклеиновых кислот. Журнал клинической микробиологии. 1990;28(3):495–503. пмид:1691208
  38. 38. Нагамин К., Хасэ Т., Нотоми Т. Ускоренная реакция с помощью изотермической амплификации, опосредованной петлей, с использованием петлевых праймеров. Молекулярные зонды. 2002;16(3):223–9. Эпубликовано 30 июля 2002 г. пмид:12144774.
  39. 39. Хардиндж П., Мюррей Дж.А. Сокращение числа ложных срабатываний и улучшение отчетов об изотермической амплификации, опосредованной петлей, с использованием погашенных флуоресцентных праймеров.Научные отчеты. 2019;9(1):1–13.
  40. 40. Коттур Дж., Наир Д.Т. Гидролиз пирофосфата является неотъемлемой и критической стадией реакции синтеза ДНК. Исследование нуклеиновых кислот. 2018;46(12):5875–85. пмид:29850882
  41. 41. Сендер Р., Бар-Он Ю.М., Глейзер С., Бернштейн Б., Фламхольц А., Филлипс Р. и др. Общее количество и масса вирионов SARS-CoV-2. Труды Национальной академии наук. 2021;118(25):e2024815118. пмид:34083352
  42. 42. Батлер Д.Дж., Моссари С., Мейдан С., Данко Д., Фокс Дж., Розиен Дж. и др.Транскриптом дробовика и изотермическое профилирование инфекции SARS-CoV-2 выявляют уникальные реакции хозяина, вирусную диверсификацию и лекарственные взаимодействия. bioRxiv. 2020:2020.04.20.048066. пмид:32511352

СРАВНЕНИЕ ЭПОКСИДНЫХ, ВЛАГООТВЕРЖДАЕМЫХ УРЕТАНОВЫХ И СИЛОКСАНОВЫХ ТЕХНОЛОГИЙ НА БЕТОНЕ, РЖАВЧИНЕ И НЕОРГАНИЧЕСКОМ ЦИНКОВОМ ПОКРЫТИИ

Несмотря на то, что за последние два десятилетия были достигнуты большие успехи в разработке специальных ремонтных покрытий для восстановления как бетонных конструкций, так и менее подготовленных стальных поверхностей, борьба с коррозией по-прежнему осложняется катастрофическими повреждениями покрытия. В этой статье описываются исследования по определению проникающей, смачивающей и адгезионной способности различных покрытий при нанесении на различные пористые подложки, такие как отвержденный и сырой бетон, ржавчина и алкилсиликатное неорганическое цинковое покрытие. Сканирующая электронная микроскопия, оптическая микроскопия и различные физические тесты использовались для характеристики действия проникающих герметиков-кандидатов. Пять непигментированных двухкомпонентных эпоксидных пенетрантов сравнивали с тремя пигментированными однокомпонентными уретановыми пенетрантами, отверждаемыми влагой.Остальные покрытия представляли собой три двухкомпонентных толстослойных эпоксидных смолы, метакрилатное и одно полисилоксановое покрытие. Результаты показали, что хорошей адгезии к сырому бетону можно добиться с помощью различных покрытий. Глубокого проникновения в бетонную поверхность не требовалось для достижения прочной адгезии. Поведение покрытий на свежем и зрелом бетоне гораздо больше зависит от содержания влаги, чем от зрелости пасты. Исследование также показало, что эпоксидные смолы с низкой вязкостью, тонкопленочные 100%-ные твердые вещества и метакрилат в целом обладают превосходной проникающей способностью по сравнению с другими проникающими грунтовками.Ни одна испытанная грунтовка не смогла полностью пропитать и связать рыхлые ржавые поверхности. Не было обнаружено существенной корреляции между вязкостью данного материала покрытия, его проникающей способностью и впитывающим действием. Использование беспигментных грунтовок/герметиков обеспечило лучшее смачивание и проникновение в бетон и ржавчину. Блокированный аминовый эпоксидный проникающий герметик и модифицированный метакрилатный герметик почти толщиной с воду продемонстрировали наилучшее проникающее и впитывающее действие. Учитывая, что метакрилатный герметик можно покрывать только самим собой, блокированный аминовый эпоксидный проникающий герметик был определен как лучшая грунтовка из 12 покрытий.Эти грунтовки/герметики показали хорошее проникновение и адгезию к влажному бетону и ржавым поверхностям.

Язык

Информация о СМИ

Тематические/указательные термины

Информация о подаче

  • Регистрационный номер: 00759704
  • Тип записи: Публикация
  • Файлы: ТРИС
  • Дата создания: 10 февраля 1999 г., 00:00

Ваш бизнес подвергается атаке на цепочку поставок?

05 Фев Ваш бизнес подвергается атаке на цепочку поставок?

Опубликовано в 09:55 в Блоги, Видео Ди Фриз
Вы в такой же безопасности, как и ваши партнеры

Гил Фридрих

Нью-Йорк, Н.Ю. – 4 февраля 2022 г.

Одним из основных векторов кибератак является цепочка поставок.

Компании работают с множеством различных поставщиков, продавцов и других третьих лиц. Будь то ключевой клиент, сторонний партнер по выставлению счетов или компания, поставляющая кулер для воды в ваш офис, организации ежедневно общаются с бесчисленным количеством сторонних компаний. Атака на цепочку поставок (также известная как атака поставщика) происходит, когда злоумышленник компрометирует третью сторону. Когда взломан доверенный партнер, все компании, с которыми он ведет бизнес, подвергаются риску.

Этот риск реален и растет. Он попал в заголовки газет после атак на SolarWinds, Kaseys и Accellion. Но не только крупные компании находятся в зоне риска. Это все.

Опрос, проведенный в октябре 2021 года, показал, что нарушение в цепочке поставок затронуло 97 процентов компаний; кроме того, 93 процента заявили, что они пострадали от нарушения непосредственно из-за слабости поставщиков. Еще больше усложняло ситуацию то, что бреши (на 37%) росли быстрее, чем бюджеты на кибербезопасность (на 26%).

Вызывает такую ​​обеспокоенность тот факт, что Агентство Европейского Союза по кибербезопасности ожидало четырехкратного увеличения числа таких атак и отметило, что вредоносное ПО используется в 62 процентах атак, наблюдаемых до сих пор.

Это новая поговорка: ваша безопасность настолько хороша, насколько хороша безопасность вашего партнера.


Cybercrime TV: Гил Фридрих, основатель и генеральный директор Avanan

Защита почтовых ящиков Office 365 от фишинговых атак


Возьмем этот пример из мира финансов.Допустим, поставщик, с которым вы работаете, взломан злоумышленником. Очень легко этот хакер может начать рассылать счета и ссылаться на чужие банковские счета.

Вот сложная часть: адрес электронной почты отправителя будет действительным. Стандартные метки проверки отправителя будут пройдены.

Внимательные пользователи могут обнаружить явные признаки того, что что-то не так в условиях выставления счетов и мелком шрифте. Или адрес для ответа может отличаться от того, к которому вы привыкли.

Эта кибергигиена со стороны конечных пользователей невероятно важна и всегда рекомендуется.Но этого может быть недостаточно.

Или возьмите этот более общий пример. Компания А была взломана. Хакер отправляет электронные письма со своего аккаунта множеству компаний. Когда компания A отправляет электронное письмо компании B, у которой есть защита цепочки поставок, электронное письмо останавливается.

Вот почему так важно обеспечить безопасность цепочки поставок. Однако не все средства защиты цепочки поставок столь же надежны, как другие.

Для лучшей безопасности решение должно автоматически узнавать список поставщиков и партнеров компании.Если вам приходится загружать или поддерживать базу данных вручную, очень легко забыть поставщика.

Кроме того, решение должно автоматически определять важность партнера или поставщика для организации, анализируя такие факторы, как схемы трафика, привлекаемых ими сотрудников и многое другое. Он должен иметь возможность оценивать объем бизнеса, просматривая все счета, а затем иметь возможность динамически рассчитывать риск на основе суммы в долларах. Короче говоря, решение должно динамически и автоматически оценивать риск всей цепочки поставок компании, а затем постоянно обновлять и защищать его.

Вы не можете гарантировать, что ваши партнеры и поставщики будут в безопасности, как вы. Но вы можете работать над тем, чтобы их ошибки не стали вашими.

Запустите демонстрацию, чтобы испытать мощь и простоту Avanan

Архивы Аванана

Гил Фридрих является соучредителем и генеральным директором Avanan .


Об Аванане  

Avanan — это облачная платформа безопасности электронной почты, которая впервые запатентовала новый подход к предотвращению изощренных атак.Мы используем API для поиска фишинга, вредоносного ПО и утечки данных в коммуникационном трафике. Это означает, что мы обнаруживаем угрозы, пропущенные Microsoft, и добавляем прозрачный уровень безопасности для всего пакета и других инструментов для совместной работы, таких как Slack.

Avanan перехватывает расширенные атаки, которые обходят стандартные и расширенные инструменты безопасности. Его невидимая многоуровневая система безопасности обеспечивает комплексную защиту облачных решений для совместной работы, таких как Office 365™, G-Suite™ и Slack™. Платформа развертывается одним щелчком мыши через API, чтобы предотвратить компрометацию корпоративной электронной почты и блокировать фишинг, вредоносное ПО, утечку данных, захват учетных записей и теневую ИТ-инфраструктуру на предприятии. Avanan заменяет необходимость в нескольких инструментах для защиты всего пакета облачной совместной работы запатентованным решением, которое выходит далеко за рамки любого другого дополнения к безопасности электронной почты в облаке.

«Бостон Селтикс» погасили нападение «Хит» в решающей победе со счетом 122-92

Если бы Макс Струс вернулся в TD Garden и забил 9 из 17 из трех в одиночку, это означало бы еще одну жуткую ночь для «Селтикс». Вместо этого приглашенный в тренировочный лагерь «Селтика» в прошлом сезоне стал исключением из-за ледяной ночи наступления для Хит с коротким составом.Бостон закончил игру в начале четвертого, выиграв со счетом 122–92.

Джейлен Браун набрала 29 очков в бросках 11 из 19. Джейсон Татум добавил 20 очков, 12 подборов и 5 передач при 7 из 15. Маркус Смарт отдал семь результативных передач и забил четыре тройки.

В начале этого сезона нападение вернулось к основам, чтобы решить проблемы с упрощением формальностей и подключением, которые преследовали команду в последние годы. Неприятности «Бостона» против зоны «Майами Хит» в восточном финале 2020 года стали тревожным звонком для решения этой всеобъемлющей проблемы, и с тех пор у них были проблемы с защитой от падения, блицами и зонами, которые не позволяют «Селтикс» получить доступ к краске.Они решили эти проблемы, одержав подряд победы над «Пеликанс» и «Хит», что увеличило недавнюю серию «Бостона» до девяти побед из последних 13.

Смарт играл в центре в Новом Орлеане, позволив Брауну и Татуму стать бросками на пути к четвертой игре лиги, где каждый из них набрал по 30 очков, а Смарт повторил свой рекорд в карьере, сделав 12 передач. В понедельник в Майами сидели Джимми Батлер и Пи Джей Такер, среди прочих. Однако Бам Адебайо играл, и «Селтикс» знали, что быстро увидят зону.

«Иди и займи место, где никого нет», — объяснил Смарт в субботу, выходя из зоны. «У них есть правила в зоне, определенные парни охраняют определенные места, так что просто пытаясь найти это свободное место… особенно когда вы оказываетесь в середине, вы заставляете зону принимать решения… потому что у вас так много решений в середина. У вас есть Роб там внизу, в данкере (на месте), потому что большинство команд не собирается помогать ему, а это значит… перед вами кто-то есть, один из углов открыт, и вы должны найти правильное место, чтобы получить мяч.

В любом случае они вырвались вперед на 15 очков, как и в своей победе в начале сезона в Майами, удерживая Хит до старта 6 из 21 и атакуя Калеба Мартина, Гейба Винсента и Дункана Робинсона с большим стартовым составом Бостона. . Они отправили Роберта Уильямса III вниз по склону, Смарт снова занял высокий пост и нашел Уильямса III в отложенном пик-н-ролле.

Татум попал в пару прыгунов над Мартином и Винсентом и даже попал в высокую штангу, чтобы начать последовательность пасов, в которой Грант Уильямс нашел открытый трехочковый взгляд против защиты Хит, которая качнулась справа налево.

Смарт нашел Эла Хорфорда на троих, затем заставил Хорфорда поменяться местами, и Робинсон сбил его с раннего фола, а большой человек последовал за ним с крюком внутри, что помогло «Селтикс» выйти вперед со счетом 18–7.

Бостон увеличил отрыв до 13 очков во второй четверти, но появление Тайлера Херро создало проблемы для Гранта Уильямса и игроков периметра Бостона, даже после того, как Грант в первой четверти забил впечатляющий блок на шестом кандидате года.

Херро пробил подряд над Грантом и Хорфордом, Струс забил свои первые три мяча, а Крис Сильва схватил атакующую доску из-за недопонимания переключения Бостона, а затем ударил Кайла Гая с тремя, чтобы вернуться в пределах семи.

Име Удока повернулся к комбинации Смарта и Шредера, и атака полностью застряла. Пара пропустила трехочковые броски, Смарт провалил пару штрафных бросков, Браун добавил еще один промах, а Херро и Струс увеличили результативность до 16-1 и сравняли счет 32.

Тайм-аут Удоки и корректировка состава быстро подавили коллапс. В нападении мяч перешел к Брауну на тройку, Смарт украл мяч у Мартина и отбил его обратно для простоя, прежде чем Браун заблокировал среднего рейнджера и выровнял корабль до конца игры.

Даже громкие данки Мартина и Адебайо над Уильямсом III не смогли превзойти броски, скорость, движения и подборы в атаке «Селтикс» в середине игры. Хорфорд поймал промах Брауна из глубины и передал его Татуму, который отдал пас на Смарта на тройку из глубины в пробке. Татум забил три мяча позже, а после этого поехал на акробатический финиш. Бостон вел 54-45 в перерыве между таймами.

Браун и Тейтум оба начали со счетом 5 из 10, быстро найдя друг друга и перейдя в третью четверть, поднявшись со счетом 71-57.Умный удар Татума при быстром входе на тройку, Татум и Браун сыграли через Хорфорда в углу, чтобы получить тройку Брауна.

Браун атаковал на половине корта, Татум опередил перехват Уильямса III и сделал данк, затем Браун использовал свое преимущество, чтобы найти Гранта для трех подряд подряд. «Майами» смог приблизиться только к тому, что было во втором тайме: 11 точных троек в конце третьего от Робинсона, который рано получил свой третий фол, затем Струса и Эрро.

«Хит» не забила в семи из восьми последних владений мячом в фрейме, защитникам «Селтикс» не хватило проникновения и бросков, чтобы удержаться впереди них.В итоге «Хит» прибегла к дальним ударам в четвертом и не добилась большего успеха, не набрав очков в шести из своих первых восьми сетов в четвертом, даже с двумя владениями, когда у них было несколько шансов после подборов в атаке.

Браун и Деннис Шредер набрали восемь очков подряд и вывели «Селтикс» вперед со счетом 102–74, а скамейки запасных, в том числе редкий прицел Удониса Хаслема, вылились в игру. «Селтикс» возвращаются в TD Garden в среду вечером, чтобы отомстить «Хорнетс».

(PDF) Аналитическое исследование электромагнитных условий глубокого проникновения и последствий в средах с потерями через неоднородные волны

Материалы 2018,11, 1595 14 из 15 два сигнала

совпадают. Этот результат имеет важные последствия для практических приложений: используя подходящую конструкцию антенны с утечкой волны

, требуемую амплитуду электрического поля можно получить в среде с потерями

, избегая усиления поля на границе раздела и, следовательно, уменьшая

риски перегрева или прогорания поверхностных слоев, присутствующие при использовании более традиционных однородных

волн. В других случаях, которые могут представлять интерес, например, когда пики амплитуды поля

для двух сигналов совпадают в отсутствие среды с потерями, но однородная волна

представляет собой большую амплитуду поля на поверхности раздела

анализ различных факторов, таких как форма лучей и рассматриваемая среда, может быть

необходимым для определения того, какая форма волны обеспечивает большее проникновение: в этих случаях далее

необходимо будет провести исследования с использованием реалистичных конструкций антенн.

5. Выводы

В настоящей статье представлено аналитическое исследование эффекта глубокого проникновения, достигаемого

неоднородными плоскими волнами. Было изучено влияние различных материалов на условие глубокого проникновения

, и также были указаны подходящие конечные формы волны, упомянутые волны утечки, как способ достижения

глубокого проникновения в ближней зоне. Были также указаны некоторые ограничения и возможности этих волновых форм. Будущие исследования будут сосредоточены на численном моделировании, чтобы определить степень этого эффекта,

достижимого при использовании реалистичных и конечных структур.

Вклад авторов:

Концептуализация и формальный анализ: П.Б., Ф.Ф., П.С. и Н.Т.; Расследование: П.Б. и

PS; Моделирование и программное обеспечение: N.T.; Подготовка проекта: П.Б., П.С. и Н.Т.; Письмо — Обзор: PB, F.F., P.S. и Н.Т.;

Надзор: Ф.Ф.

Финансирование: Это исследование не получило внешнего финансирования.

Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Ссылки

1.

Курто, С.; МакЭвой, П.; Бао, X .; Амманн, М. Дж. Компактная патч-антенна для электромагнитного взаимодействия с

тканями человека на частоте 434 МГц. IEEE транс. Антенны Распространение. 2009, 57, 2564–2571. [CrossRef]

2.

Сингх, С.; Сингх, С. Микрополосковая щелевая антенна для применения в гипертермии. В материалах конференции по электромагнетизму Applied

(AEMC), Гувахати, Индия, 18–21 декабря 2015 г. ; стр. 1–2.

3.

Мохаммед, Б.Дж.; Аббош, AM; Ирландия, Д.; Бялковский, М.E. Компактная широкополосная антенна для микроволновой

визуализации головного мозга. прог. Электромагн. Рез. С 2012, 27, 27–39. [CrossRef]

4.

Montecchia, F. Конструкция микрополосковой антенны для гипертермического лечения поверхностных опухолей. IEEE транс.

Биомед. англ. 1992, 39, 580–588. [CrossRef] [PubMed]

5.

Тейлор, Л. Аппликаторы проникающих электромагнитных волн. IEEE транс. Антенны Распространение.

1984

,32, 1138–1141.

[Перекрестная ссылка]

6.

Д’Амброзио, Г.; Мильоре, М. Заземленный диэлектрический слой, питаемый линией тока, в качестве планарного микроволнового аппликатора

. IEEE транс. Антенны Распространение. 1994, 42, 1467–1475. [CrossRef]

7.

Frezza, F.; Тедески, Н. Глубоко проникающие волны в средах с потерями. Опц. лат.

2012

,37, 2616–2618. [CrossRef]

[PubMed]

8.